[發明專利]一種銀杏內酯的提取分離方法有效
| 申請號: | 201210121252.0 | 申請日: | 2012-04-23 |
| 公開(公告)號: | CN102659808A | 公開(公告)日: | 2012-09-12 |
| 發明(設計)人: | 孫毅;朱永紅;童正兵;王婕 | 申請(專利權)人: | 成都百裕科技制藥有限公司 |
| 主分類號: | C07D493/22 | 分類號: | C07D493/22;C07D493/20 |
| 代理公司: | 成都虹橋專利事務所 51124 | 代理人: | 高蕓 |
| 地址: | 611130 四川省成都市溫江區*** | 國省代碼: | 四川;51 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 銀杏 內酯 提取 分離 方法 | ||
1.銀杏內酯的提取分離方法,其特征在于:步驟如下:
A、提取:粉碎銀杏葉,加有機溶劑提取,濃縮提取液中加抗氧化保護劑,用pH調節劑調pH值至4~5,濃縮、冷藏;
其中,步驟A所述提取有機溶劑為乙醇、丙酮或乙酸乙酯,濃度為50~80%v/v,用量為5~12倍量;
B、萃取:將冷藏后的濃縮液先用正己烷或石油醚萃取2~3次;水相用脂溶性溶劑萃取4~5次,再用水飽和仲丁醇-乙酸乙酯混合溶劑或水飽和正丁醇-乙酸乙酯混合溶劑萃取4~5次,合并有機相萃取液,減壓濃縮;
C、過柱:將萃取濃縮液過聚酰胺樹脂柱,依次用1~5BV水、3~5BV?20%~40%v/v乙醇、2~3BV?60%~90%v/v乙醇洗脫,控制洗脫液流速為2~3BV/h;合并洗脫液;減壓濃縮,干燥;
D、析晶:將過柱后的干燥物加入沸水中,攪拌溶解,冷卻,上清液用等體積乙酸乙酯、甲酸乙酯或丙酮萃取4~5次,合并萃取液,減壓濃縮,蒸干,加5~8倍量30%~50%v/v乙醇加熱攪拌溶解,過濾,冷藏,析出晶體,濾過,濾液I備用,晶體用30%~50%v/v乙醇洗滌,減壓干燥,得到晶體I;
濾液I濃縮至含醇量為10%~30%v/v,冷藏,析出晶體,濾過,濾液II備用;用30%~50%v/v乙醇洗滌,減壓干燥,得晶體II;
濃縮濾液II,加0.1%~0.5%活性炭吸附,過濾,濾液濃縮至含醇量為10%~30%v/v,冷藏,析出晶體,濾過,濾液III備用;晶體用30%~50%v/v乙醇洗滌,減壓干燥,得晶體III;
濾液III濃縮,過活性炭-硅膠柱,先用30%~50%v/v乙醇洗脫,再用70%~90%v/v乙醇洗脫,收集洗脫液濃縮至含醇量為10%~30%v/v,冷藏,析出晶體,濾過,濾液IV備用;晶體用30%v/v乙醇洗滌,減壓干燥,得晶體IV;
濾液IV濃縮,冷藏,析出晶體,濾過,晶體用30%v/v乙醇洗滌,減壓干燥,得晶體V;
E、混晶:將晶體I、II、III、IV、V混合均勻,粉碎,即得銀杏內酯。
2.根據權利要求1所述的銀杏內酯的提取分離方法,其特征在于:步驟A所述提取的方式為回流提取或煎煮提取。
3.根據權利要求2所述的銀杏內酯的提取分離方法,其特征在于:所述回流提取采用乙醇、丙酮或乙酸乙酯提取,其中,不同提取溶劑的濃度及提取條件如下:
乙醇:濃度為50%~80%v/v,提取溫度75~85℃,提取次數2~3次,時間每次1~2小時;
丙酮:濃度為50%~80%v/v,提取溫度45~55℃,提取次數2~3次,時間每次1~2小時;
乙酸乙酯:濃度為50%~80%v/v,提取溫度55~65℃,提取次數2~3次,時間每次1~2小時;
進一步,優選提取條件為:提取3次,每次1.5小時;乙醇濃度65%v/v;丙酮濃度50%v/v;乙酸乙酯濃度60%v/v。
4.根據權利要求2所述的銀杏內酯的提取分離方法,其特征在于:所述煎煮提取采用乙醇、丙酮或乙酸乙酯提取,其中,不同提取溶劑的濃度及提取條件如下:
乙醇:濃度為50%~80%v/v,提取溫度80~90℃,提取次數2~3次,時間每次1~2小時;
丙酮:濃度為50%~80%v/v,提取溫度50~60℃,提取次數2~3次,時間每次1~2小時;
乙酸乙酯:濃度為50%~80%v/v,提取溫度60~65℃,提取次數2~3次,時間每次1~2小時;
進一步,優選提取條件為:提取3次,每次1.5小時;乙醇濃度65%v/v;丙酮濃度50%v/v;乙酸乙酯濃度60%v/v。
5.根據權利要求1所述的銀杏內酯的提取分離方法,其特征在于:步驟A所述抗氧化保護劑為中性氨基酸;
進一步,抗氧化保護劑優選絲氨酸、蛋氨酸、天冬酰胺或蘇氨酸中的至少一種;
進一步,抗氧化保護劑最優選蛋氨酸。
6.根據權利要求1所述的銀杏內酯的提取分離方法,其特征在于:步驟A所述pH調節劑為有機弱酸;
進一步,pH調節劑優選枸櫞酸、蘋果酸或山梨酸中的至少一種;
進一步,pH調節劑最優選枸櫞酸。
7.根據權利要求1所述的銀杏內酯的提取分離方法,其特征在于:步驟B所述脂溶性溶劑為乙酸乙酯、甲酸乙酯、丙酮、丁酮中的至少一種。
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