1.人宮內(nèi)膜(經(jīng)血)干細(xì)胞庫的構(gòu)建，其特征在于：

(1)干細(xì)胞的采集和運(yùn)輸，用醫(yī)用級(jí)硅膠杯收集月經(jīng)干送至干細(xì)胞制備室。

(2)干細(xì)胞信息記錄，將運(yùn)送至干細(xì)胞制備室的樣本信息輸入“宮內(nèi)膜(經(jīng)血)干細(xì)胞儲(chǔ)存信息表”。

(3)干細(xì)胞的制備，月經(jīng)在GMP車間處理后在特殊的培養(yǎng)基中培養(yǎng)擴(kuò)增。

(4)干細(xì)胞的質(zhì)檢，將培養(yǎng)擴(kuò)增的干細(xì)胞進(jìn)行質(zhì)量檢驗(yàn)。

(5)干細(xì)胞的凍存，質(zhì)檢合格的干細(xì)胞儲(chǔ)存于-196℃液氮罐中以備用。

(6)干細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)及發(fā)送，從液氮罐中取出的干細(xì)胞快速復(fù)蘇后，在擴(kuò)增培養(yǎng)基中培養(yǎng)并質(zhì)檢和發(fā)放。

(7)庫的信息化管理，將干細(xì)胞從采集到發(fā)放的完整過程記錄備案。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的人宮內(nèi)膜(經(jīng)血)干細(xì)胞庫的構(gòu)建，其特征是：(1)干細(xì)胞的采集和運(yùn)輸。簽訂“月經(jīng)干儲(chǔ)存服務(wù)協(xié)議書”，儲(chǔ)戶取出“月經(jīng)干采集運(yùn)輸醫(yī)用級(jí)泡沫盒”內(nèi)的醫(yī)用級(jí)硅膠杯，外陰經(jīng)無菌消毒布?jí)K消毒后，在月經(jīng)第二天收集，所收集的樣本裝入抗菌素和抗凝劑，并按照要求包裝好“月經(jīng)干采集運(yùn)輸醫(yī)用級(jí)泡沫盒”(放好小冰塊和干燥劑等)，填寫好“月經(jīng)干采集運(yùn)輸信息表”(包括儲(chǔ)戶的肝炎檢驗(yàn)如HAV、HBV、HCV、HDV和HEV，及病毒如HIV-1/2、梅毒螺旋體、巨細(xì)胞病毒及寄生蟲等)。樣本保持在1-10°范圍內(nèi)，收集完24小時(shí)內(nèi)發(fā)送至干細(xì)胞制備室。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的人宮內(nèi)膜(經(jīng)血)干細(xì)胞庫的構(gòu)建，其特征是：(2)干細(xì)胞信息記錄。樣本運(yùn)至干細(xì)胞接收室后，將儲(chǔ)戶基本信息、基本體檢信息和/或疾病史等、樣本收集信息、樣本運(yùn)輸信息、樣本外觀等信息、樣本至干細(xì)胞接收室交接信息等輸入“宮內(nèi)膜(經(jīng)血)干細(xì)胞儲(chǔ)存信息表”，并留存“月經(jīng)干采集運(yùn)輸信息表”。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的人宮內(nèi)膜(經(jīng)血)干細(xì)胞庫的構(gòu)建，其特征是：(3)干細(xì)胞的制備。月經(jīng)干樣本在GMP100級(jí)車間用混合抗菌素包括萬古霉素、頭孢噻肟鈉、氨基羥丁基卡那霉素A(即：抗菌素BBK8)、慶大霉素和兩性霉素B處理防止污染，用100目濾網(wǎng)過濾以去除組織塊，并用PBS洗滌，重懸于DMEM/F12完全培養(yǎng)基，以1X10⁵/ml接種于經(jīng)10ug/ml多聚賴氨酸包被的T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，并添加：5ng/ml?ITS(胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白、硒)，100u/ml青霉素，100u/ml鏈霉素，2％人血清，10ng/ml?of?rEGF，10ng/ml?of?rPDGF-bb，15ng/ml?ofLIF，20ng/ml?of?bFGF，常規(guī)培養(yǎng)8小時(shí)后，去除上清液(過濾除去雜質(zhì)細(xì)胞以備后用)。同時(shí)用0.25％胰酶邊消化、離心，并接種于多聚賴氨酸包被的T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的人宮內(nèi)膜(經(jīng)血)干細(xì)胞庫的構(gòu)建，其特征是：(4)干細(xì)胞的質(zhì)檢。P2代干細(xì)胞上清液質(zhì)檢：革蘭氏菌涂片、厭氧菌、需氧菌培養(yǎng)、真菌和霉菌，干細(xì)胞經(jīng)0.25％胰酶消化后800r/min離心6min重懸，用DMEM/F12完全培養(yǎng)液洗二次，并進(jìn)一步做有核細(xì)胞計(jì)數(shù)及活力觀察、流式檢測(CD44，CD73和CD34)、克隆集落形成實(shí)驗(yàn)。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的人宮內(nèi)膜(經(jīng)血)干細(xì)胞庫的構(gòu)建，其特征是：(5)干細(xì)胞的凍存。需凍存的干細(xì)胞用低溫儲(chǔ)存條碼編號(hào)，并按比例凍存：10％的DMSO、30％PBS、10％人血清白蛋白(25％)、50％干細(xì)胞懸液。凍存液及干細(xì)胞在加入凍存管前冷卻至2-8℃，細(xì)胞加入凍存液后以(1-2)X10⁶/ml濃度凍存。凍存管在-86℃冰箱凍存2-4小時(shí)后移至-196℃液氮罐中保存。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的人宮內(nèi)膜(經(jīng)血)干細(xì)胞庫的構(gòu)建，其特征是：(6)干細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)及發(fā)送。從液氮罐中取出的干細(xì)胞放入37-40℃水浴，融化的細(xì)胞經(jīng)完全培養(yǎng)基洗滌接種于T-25組織培養(yǎng)瓶，并加入相關(guān)營養(yǎng)因子，常規(guī)培養(yǎng)。干細(xì)胞培養(yǎng)達(dá)到臨床需求時(shí)消化干細(xì)胞，并做質(zhì)檢：細(xì)胞活力、數(shù)量、革蘭氏染色。按照臨床要求填寫“宮內(nèi)膜干細(xì)胞發(fā)放報(bào)告單”，中心主任簽字認(rèn)可發(fā)放。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的人宮內(nèi)膜(經(jīng)血)干細(xì)胞庫的構(gòu)建，其特征是：(7)庫的信息化管理。將干細(xì)胞從采集、運(yùn)輸、交接、制備、質(zhì)檢、凍存、復(fù)蘇、培養(yǎng)、發(fā)送等實(shí)驗(yàn)步驟的詳細(xì)信息完整地輸入“宮內(nèi)膜(經(jīng)血)干細(xì)胞儲(chǔ)存信息表”，同時(shí)保留原始的實(shí)驗(yàn)記錄簿(兩人簽字)。做好廢棄樣本或干細(xì)胞的信息記錄以及醫(yī)用廢棄物處理。注意：質(zhì)檢報(bào)告需要加入廠房維護(hù)、車間消毒、儀器設(shè)備的驗(yàn)證、物料批次、工藝、人員培訓(xùn)等相關(guān)質(zhì)檢內(nèi)容也應(yīng)輸入“宮內(nèi)膜(經(jīng)血)干細(xì)胞儲(chǔ)存信息表”。