技術領域

????本發明屬于膜分離技術領域，涉及一種去除生物醫藥制劑中內毒素的方法，具體地說是一種利用無機超濾膜去除生物醫藥制劑中內毒素的方法。

背景技術

????目前，疫苗、注射液、大輸液、放射性藥品、化學藥品、抗生素藥品、生物制品（血液制品、疫苗）、中草藥注射劑、透析液等生物醫藥制劑中都含有內毒素；而如何有效去除醫藥制劑中的內毒素以及研究適用于大批量醫藥制劑生產過程的內毒素去除材料和方法是今后生物醫藥領域研究的熱點。

內毒素是產生于革蘭氏陰性細菌細胞外壁層的脂多糖類物質，亦即細菌尸體的碎片。內毒素一般以聚體形式存在，其磷酸基團與二價金屬離子螯合可進一步穩定內毒素分子間的聚合，促成更大的內毒素復合體，這類復合體的分子量可由幾千至數千萬不等。內毒素具有體積小、熱穩定性強、化學穩定性強等特性，使其在被去除方面有一定難度。

人體對內毒素極為敏感。如有微量內毒素混入藥劑中注入人體血液系統，會導致嚴重發熱，甚至引起死亡。如極微量（1～5?ng/kg體重）內毒素就能引起體溫上升，發熱反應持續約4小時后逐漸消退。自然感染時，因革蘭氏陰性菌不斷生長繁殖，同時伴有陸續死亡、釋出內毒素，故發熱反應將持續至體內病原菌完全消滅為止。當受感病人（或動物）的血液或病灶中的細菌向血液中釋放了很多內毒素，或者相當大量的被內毒素污染的液體輸入了病人（或動物）體內時，易患上內毒素血癥。因此，盡可能降低制劑中內毒素的含量是十分必要的，特別當注射液（如大輸液）用量較大時，對內毒素的含量要求應更為嚴格，國家藥典中規定注射品中內毒素應小于1?EU/mL。

隨著生物產品在制藥工業中占的比例越來越大，內毒素的去除方法越來越多，工藝應用也越來越廣，內毒素去除工藝將具有更大的經濟效益與無窮的市場潛力。由于制劑中的內毒素含量小而危害大，所以要求去除內毒素的方法具有高效、可靠及具有高度特異性，同時在去除過程中應保持制劑的本身性質及有效成分。目前用來去除內毒素的方法主要有活性炭吸附法、化學降解法、相分離法、離子交換色譜法、親和色譜法、超濾法等。與前面幾種內毒素的分離方法相比，超濾法采用的超濾膜孔徑與細菌內毒素相近，所以用小孔徑超濾膜去除細菌內毒素相對比較可靠。根據被處理藥液特性及其內毒素含量的多少，選擇孔徑較小且孔徑分布均勻的截留分子量6000?的外壓式超濾膜，可有效截留細菌及內毒素，使其含量指標達到標準。在操作方式、使用壽命、處理量及設備造價等方面也具有一定的優勢，超濾法作為一種新工藝、新技術是最易行最有市場前景的方法，適合于在制藥行業推廣應用。

與有機超濾膜相比，無機膜的主要材質是金屬或金屬氧化物，具有耐腐蝕、熱化學穩定性強，孔徑分布均勻等優勢，可用于有機體系制劑的過濾。無機膜過濾設備在過濾前可進行高溫消毒、殺菌等預處理，在去除細菌內毒素方面更安全可靠、有效。在使用壽命上，無機膜具有較高的機械強度，使用時間是有機膜的2～3倍。

發明內容

本發明的目的在于提供一種從生物醫藥制劑中去除內毒素的方法，用該方法可以高效地去除制劑中的內毒素，適用于大規模醫藥生產的需求。

為了實現本發明的技術目的，本發明的技術方案如下：

一種去除生物醫藥制劑中內毒素的方法，包括生物醫藥制劑原料液高溫蒸汽滅菌預處理、活性炭吸附預處理、無機超濾膜過濾處理三步驟；其中所述的無機超濾膜過濾處理中，濃縮液回流至生物醫藥制劑原料液中循環處理，直至無機超濾膜的膜通量衰減至原始通量的40~60%時，將原料側的濃縮料液排放并對超濾膜進行清洗；滲透液即去除了內毒素的生物醫藥制劑。

本發明可以針對生物醫藥制劑生產過程中的內毒素，根據其分子量大小、溶劑性質、有效成分性質，判斷和選擇無機超濾膜的材質。其中，無機超濾膜是多孔陶瓷膜或多孔金屬膜；膜的構型是多通道管式或片式。無機超濾膜的平均孔徑為2～50?nm。

當本發明所述的生物醫藥制劑原料液是有機溶劑體系時，無機超濾膜的端頭采用涂釉進行密封。

本發明所述的無機超濾膜的過濾處理是錯流過濾，操作壓力為0.1～0.8?MPa，溫度為10～100℃，膜面流速為0.07～10?m/s。

本發明所述的將生物醫藥制劑進行高溫蒸汽滅菌和活性炭吸附的預處理步驟中，活性炭適合于組分較為簡單的小分子的溶液中或水中內毒素的去除。

本發明所述的對超濾膜進行清洗的方法是：采用質量濃度為0.5~10%的NaOH溶液、HNO₃溶液、NaClO溶液或H₂O₂溶液對無機超濾膜進行浸泡清洗。