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[發明專利]一種測定細胞色素P450代謝活性的探針藥物組合物的制備、檢測方法及其應用無效

專利信息
申請號: 201210068594.0 申請日: 2012-03-15
公開(公告)號: CN102650620A 公開(公告)日: 2012-08-29
發明(設計)人: 李芹;婁建石;焦建杰;劉潔;汪云;張才麗 申請(專利權)人: 天津醫科大學
主分類號: G01N30/02 分類號: G01N30/02;A61K49/00
代理公司: 天津市北洋有限責任專利代理事務所 12201 代理人: 王麗
地址: 300070 *** 國省代碼: 天津;12
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摘要:
搜索關鍵詞: 一種 測定 細胞 色素 p450 代謝 活性 探針 藥物 組合 制備 檢測 方法 及其 應用
【權利要求書】:

1.一種測定細胞色素P450代謝活性的探針藥物組合物,其特征是由含有CYP450的主要亞型CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP2E1和CYP3A4的特異性探針為活性成分制備而成的制劑。

2.如權利要求1的組合物,其特征是所述的

CYP1A2特異性探針為活性成分的是咖啡因或茶堿;

CYP2C9特異性探針為活性成分的是甲苯磺丁脲或華法林;

CYP2C19特異性探針為活性成分的是奧美拉唑或美芬妥因;

CYP2D6特異性探針為活性成分的是美托洛爾或右美沙芬;

CYP2E1特異性探針為活性成分的是氯唑沙宗或氨苯砜;

CYP3A4特異性探針為活性成分的是咪達唑侖或地昔帕明。

3.如權利要求2的組合物,其特征是所述的組合物的組分和質量份數如下:

咖啡因????????????3~12份,

美托洛爾??????????18~35份,

奧美拉唑??????????18~35份,

氯唑沙宗??????????10~20份,

甲苯磺丁脲????????3~10份,

咪達唑侖??????????10~20份。

4.如權利要求1~3的任何一項權利要求所述的組合物的制備方法,其特征是步驟如下:

(1)稱取氯唑沙宗10~20份和甲苯磺丁脲3~10份溶于無水乙醇,備用;

(2)稱取探針藥物咖啡因3~12份、美托洛爾18~35份、奧美拉唑18~35份溶于生理鹽水,將(1)加入此溶液中;

(3)再準確吸取咪達唑侖10~20份加入上述混合液,配制成“cocktail”探針藥液,使各探針藥物的濃度分別為咖啡因0.3~1.2mg/ml,美托洛爾1.8~3.5mg/ml,奧美拉唑1.8~3.5mg/ml,氯唑沙宗1~2mg/ml,甲苯磺丁脲0.3~1mg/ml,咪達唑侖1~2mg/ml。

5.權利要求1的測定細胞色素P450代謝活性的探針藥物組合物的應用,將該探針藥物組合物給予動物或者與肝微粒體體外共孵育,通過測定各探針藥物的濃度而評價CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP2E1和CYP3A4的代謝活性;在新藥研發初期,高通量篩選藥物對于細胞色素P450各亞型活性的影響,從而預測藥物相互作用。

6.權利要求5的測定該六種探針藥物組合物的檢測方法,其特征是測定血漿中或肝微粒體中六種CYP450探針藥物濃度的方法,包括樣本的預處理和同時測定該六種探針藥物的高效液相色譜方法。

7.如權利要求6所述的方法,其特征是所述的樣本的預處理為含有CYP450六種探針藥物的血漿樣本的預處理;或是含有CYP450六種探針藥物的肝微粒體樣本的預處理。

8.如權利要求6或7所述的方法,其特征是所述的血漿樣本的預處理具體方法為:取含有CYP450六種探針藥物的血漿,加入內標地西泮溶液1~10μg/ml,渦旋振蕩后,用氯仿提取,渦旋,離心,取下層有機相置離心管中,然后再加入體積比為6~8∶2~4的正己烷-氯仿混合液提取,渦旋,離心,取下層有機相置離心管中,合并兩次所取有機相,置于40?℃水浴中以氮氣吹干,殘渣用流動相溶解即可。

9.如權利要求6所述的方法,其特征是所述的肝微粒體樣本的預處理具體方法為:取含有CYP450六種探針藥物的肝微粒體,加入內標地西泮溶液1~10μg/ml,渦旋振蕩,加入兩倍體積的體積比為1∶1的甲醇-乙腈混合液,旋渦,離心,取上清液進樣。

10.如權利要求6所述的方法,其特征是所述的同時測定CYP450六種探針藥物濃度的HPLC法的色譜條件是:使用碳十八反相烷基鍵合硅膠柱,采用梯度洗脫法,流動相為:甲醇、乙腈、0.05mol/L磷酸氫二銨緩沖液pH3.4的混合溶液,該混合溶液中三者體積比隨時間而變化,運行開始到5min為30∶10∶60,5~8min為35∶13∶52,8~10min為35∶14∶51,10~15min為40∶15∶45,15~35min為45∶15∶40,35~40min為30∶10∶60;流速1.0ml/min,檢測波長230nm,柱溫35℃。?

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