技術領域

本發明涉及全人源抗體，其包含經改造的重鏈和輕鏈。具體而言，本發明所述的全人源抗體為經改造的全人源單克隆抗體，具體為針對已經上市的全人源抗體帕尼單抗，利用抗體工程技術平臺，改變抗體亞型，形成全新序列的抗 EGFR全人源抗體分子，從而提高抗體ADCC及抗腫瘤活力。本發明還涉及制備所述全人源抗體的方法以及所述抗體在制備用于治療腫瘤的藥物中的用途。

背景技術

表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor，EGFR，HER1，c- ErbB1)是由1186個氨基酸殘基構成，分子量為170kD的一種跨膜糖蛋白。 EGFR分為胞外區、跨膜區和胞內區3部分(Jorissen RN，Walker F，Pouliot N，等人，Epidermal growth factor receptor：mechanisms of activation and signaling. Exp Cell Res，2003；284：31-53)。EGFR屬于I型酪氨酸激酶受體亞族(ErbB 1-4)，具有酪氨酸激酶的活性。EGFR穩定的表達于許多上皮組織，以及間質和神經源性組織。不同器官發生的實體瘤也高表達EGFR，如頭頸部癌、卵巢癌、宮頸癌、膀胱癌和食管癌等(Mendelsohn J，Baselga J.Status of epidermal growth factor receptor antagonists in the biology and treatment of cancer.J Clin Oncol， 2003；21：2787-2799)。轉化生長因子α(transforming growth factorα，TGFα) 和表皮生長因子(epidermal growth factor，EGF)等生長因子是EGFR的配體。這些配體與EGFR的結合導致EGFR二聚化，激活了受體胞內酪氨酸蛋白激酶的活性，使C末端特異的酪氨酸殘基磷酸化，為細胞內信號轉導因子提供結合位點，由此啟動Shc，Grb2，Ras/MAPK，PI3K及JAKs/STATs等多條信號轉導途徑(Mendelsohn J，Baselga J.Status of epidermal growth factor receptor antagonists in the biology and treatment of cancer.J Clin Oncol，2003； 21：2787-2799；以及Olayioye MA，Neve RM，Lane HA，等人.The EerbB Signaling network：receptor heterodimerzation in development and cancer.The EMBO J，2000； 19：3159-3167)。EGFR通過介導這些通路調節正常細胞的生長和分化，增加腫瘤細胞的侵襲力、促進血管生成、抑制腫瘤細胞的凋亡(Castillo L， Etienne-Grimaldi MC，Fischel JL，et al.Pharmacological background of EGFR targeting.Ann Oncol，2004；15：1007-1012)。EGFR在腫瘤中的高度表達及其在腫瘤細胞生長、分化中起著重要作用的這些特點，使EGFR成為具有良好前景的腫瘤診斷和治療的靶點。

近年來有越來越多證據表明表皮生長因子受體(epithelial growth factor receptor，EGFR)與許多腫瘤的發生和發展有關。在各種實體腫瘤中EGFR表達率最高的是頭頸部腫瘤，達95％-100％。結直腸癌則為第2位，表達率高達 72％-89％。EGFR表達陽性的腫瘤具有惡性度高、侵襲力強的特點，而且EGFR 表達水平的高低與預后相關。因而同樣成為當前腫瘤分子靶向治療的一個重要靶點。有依據證實HER1/EGFR在實體腫瘤中表達異常，其臨床體現為轉移，生存期縮短，預后差，對化療及激素治療耐受。阻斷HER1/EGFR后能抑制腫瘤的形成，同時改善上述狀況。

目前用于EGFR靶向性治療腫瘤的藥物主要分為兩類：EGFR單克隆抗體和小分子化合物酪氨酸激酶拮抗劑。酪氨酸激酶拮抗劑主要為小分子喹啉類化合物，能夠競爭性抑制ATP與EGFR胞內酪氨酸激酶結構域的結合，進而影響酪氨酸殘基磷酸化，抑制EGFR下游的信號轉導。