技術領域

本發明涉及植物種子真偽的鑒別領域，特別涉及大黃種子真偽的鑒別。

背景技術

大黃為蓼科植物掌葉大黃Rheum?palmatum?L.、唐古特大黃Rheumtanguticum?Maxim.ex?Balf.或藥用大黃Rheum?officinale?Baill.的干燥根及根莖。具有瀉熱通腸，涼血解毒，逐瘀通經的功效。用于實熱便秘，積滯腹痛，瀉痢不爽，濕熱黃疸，血熱吐衄，目赤，咽腫，腸癰腹痛，癰腫疔瘡，瘀血經閉，跌打損傷，外治水火燙傷；上消化道出血。掌葉大黃分布于甘肅東南部、青海、四川西部、云南西北部及西藏東部；唐古特大黃分布于甘肅、青海、四川及西藏東北部；藥用大黃分布于陜西南部、河南西部、湖北西部、四川、云南等地。華北大黃或牛耳大黃是常見的兩種偽品大黃，易與唐古特大黃等真品大黃混淆。

近年來，由于對野生大黃資源的無計劃采挖，導致野生大黃資源逐年減少，全國野生大黃資源已瀕臨枯竭。為滿足市場對優質大黃日益增長的需求量，大黃人工種植規模不斷擴大，而品質純正的種子是藥材栽培的前提，是提高藥材產量和質量的根本保障。

目前，我國藥用大黃種子沒有檢驗標準和質量標準，主要是通過形狀、大小、顏色、表皮、飾紋等性狀進行鑒別，具有一定的局限性，且因真品和偽品大黃種子形態區別較小，區分難度較大。

亟需尋找一種簡便、準確、可靠的方法鑒定真品和偽品大黃種子的方法。

發明內容

為了準確將真品和偽品大黃種子區別開，本發明提供了一種新的鑒別方法。

本發明提供了一種鑒別真偽大黃種子的方法，它包括如下步驟：

(1)取待檢種子，提取待檢種子中的大黃酚和大黃素；

(2)測定大黃種子中大黃酚和大黃素的含量；

(3)計算大黃酚含量/大黃素含量的比值；

(4)根據步驟(3)計算的比值判斷：若比值大于1，判斷該種子為真品大黃種子，若比值小于或者等于1，判斷該種子為偽品大黃種子。

所述真品大黃種子是指藥典規定的掌葉大黃Rheum?palmatum?L.、唐古特大黃Rheum?tanguticum?Maxim.ex?Balf.或藥用大黃Rheum?officinaleBaill.的種子，偽品大黃種子為包括華北大黃種子和牛耳大黃種子的其他種子。

其中，所述步驟(1)提取待測樣品中的大黃酚和大黃素的方法為：

取待測樣品粉末(過四號篩)，加入甲醇加熱回流30～90min，甲醇與樣品粉末(過四號篩)的體積質量比為150～200，放冷，補充甲醇至原重量，搖勻，濾過，揮去溶劑，加濃度為6～10％鹽酸溶液，鹽酸溶液與樣品粉末(過四號篩)的體積質量比為300～350，超聲處理1～3min，加三氯甲烷加熱回流40～80min，三氯甲烷與樣品粉末(過四號篩)的體積質量比為300～350，冷卻，分取三氯甲烷層，減壓回收溶劑。

其中，所述甲醇加熱回流60min，甲醇與樣品粉末(過四號篩)的體積質量比為167，加8％鹽酸溶液，鹽酸與樣品粉末(過四號篩)的體積質量比為333，超聲處理2min，加三氯甲烷加熱回流60min，三氯甲烷與樣品粉末(過四號篩)的體積質量比為333。

其中，所述步驟(2)中測定大黃種子中大黃酚和大黃素的含量的方法為高效液相色譜法，其流動相為甲醇和0.5％高氯酸的混合溶液，且V_甲醇∶V_{05％高氯酸}＝85∶15，且檢測波長為254nm。

優選地，所述流動相的流速為0.8ml/min。

優選地，所述高效液相色譜法的柱溫為40℃。

其中，所述步驟(4)中，若比值為1.043-2.487，判斷該種子為真品大黃種子，若比值為0.019-0.895，判斷該種子為偽品大黃種子。

本發明提供的方法可以簡便、快速、準確地區別真品和偽品大黃種子，為大黃的人工大規模種植提供保障。

顯然，根據本發明的上述內容，按照本領域的普通技術知識和慣用手段，在不脫離本發明上述基本技術思想前提下，還可以做出其它多種形式的修改、替換或變更。

以下通過實施例形式的具體實施方式，對本發明的上述內容再作進一步的詳細說明。但不應將此理解為本發明上述主題的范圍僅限于以下的實例。凡基于本發明上述內容所實現的技術均屬于本發明的范圍。

具體實施方式

儀器與試藥