[發明專利]沙門菌yncD基因敲除載體及其制備方法及制備的沙門菌減毒疫苗有效
| 申請號： | 201110046514.7 | 申請日： | 2011-02-25 |
| 公開（公告）號： | CN102172399A | 公開（公告）日： | 2011-09-07 |
| 發明（設計）人： | 叢延廣;熊坤;王景;陳志瑾 | 申請（專利權）人： | 中國人民解放軍第三軍醫大學 |
| 主分類號： | A61K39/112 | 分類號： | A61K39/112;C12N15/63;A61P31/04 |
| 代理公司： | 重慶志合專利事務所 50210 | 代理人： | 胡榮琿 |
| 地址： | 400038 重*** | 國省代碼： | 重慶;85 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 沙門 yncd 基因 載體 及其 制備 方法 減毒疫苗 | ||
1.一種沙門菌減毒疫苗，其特征在于，所述疫苗是將yncD基因敲除而實現減毒的沙門菌減毒疫苗。
2.根據權利要求1所述的沙門菌減毒疫苗，其特征在于，所述疫苗是通過沙門菌yncD基因敲除載體敲除yncD基因。
3.根據權利要求2所述的沙門菌減毒疫苗，其特征在于，所述沙門菌yncD基因敲除載體包含pYG4質粒序列和中間去掉yncD基因序列同時保證閱讀框不發生變化的yncD基因上下游序列。
4.根據權利要求3所述的沙門菌減毒疫苗，其特征在于，所述中間去掉yncD基因序列同時保證閱讀框不發生變化的yncD基因上下游序列如SEQ?ID?NO：2所示。
5.根據權利要求3所述的沙門菌減毒疫苗，其特征在于，所述pYG4質粒序列如SEQ?ID?NO：1所示。
6.根據權利要求1至5任一項所述的沙門菌減毒疫苗，其特征在于，所述沙門菌為傷寒沙門菌、甲型副傷寒沙門菌、乙型副傷寒沙門菌、丙型副傷寒沙門菌、腸炎沙門菌、豬霍亂沙門菌和鼠傷寒沙門菌中的至少一種。
7.一種沙門菌yncD基因敲除載體，其特征在于，包含pYG4質粒序列和中間去掉yncD基因序列同時保證閱讀框不發生變化的yncD基因上下游序列。
8.根據權利要求7所述的沙門菌yncD基因敲除載體，其特征在于，所述pYG4質粒序列如SEQ?ID?NO：1所示，所述中間去掉yncD基因序列同時保證閱讀框不發生變化的yncD基因上下游序列如SEQ?ID?NO：2所示。
9.權利要求7或8所述的沙門菌減毒疫苗制備方法，其特征在于有以下步驟：
1)通過PCR方式獲得拼接在一起的中間去掉yncD基因序列同時保證閱讀框不發生變化的yncD基因上下游序列；
2)將步驟1)獲得的中間去掉yncD基因序列同時保證閱讀框不發生變化的yncD基因上下游序列插入pYG4質粒中，獲得所述沙門菌yncD基因敲除載體。
10.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，步驟1)包括在所述PCR中應用SEQ?ID?NO：3-6所示的引物進行PCR擴增。
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