技術領域

本申請案涉及真核病原體和寄生蟲、尤其瘧原蟲子孢子階段寄生蟲的純化。更具體來說，其涉及實質上純凈的寄生蟲和其制備和使用方法。本申請案還涉及減毒和非減毒的純化子孢子階段瘧原蟲寄生蟲的疫苗和醫藥組合物，以及在疫苗和其它制劑中使用所述組合物來防止瘧疾和其它疾病、治療疾病和在瘧疾疫苗和藥物測試中作為感染志愿者的方式的方法。

背景技術

瘧疾是一種估計可影響3億到5億人的疾病并且每年殺死100萬到300萬人。其對發展中國家、尤其是撒哈拉以南非洲的人民還具有巨大經濟影響。惡性瘧原蟲(Plasmodium?falciparum)占世界上因瘧疾死亡病例的大多數。世界旅游組織(World?Tourist?Organization)報告，在2000年在世界范圍內記錄有幾乎7億國際游客，約900萬到訪西非、中非或東非，3700萬到訪東南亞，600萬到達南非并且1000萬到訪大洋洲。估計每年有超過30,000名來自北美、歐洲和日本的旅客感染瘧疾。在100多年中，每次軍事行動，如果發生瘧疾傳播，美國部隊因瘧疾而傷亡的人員都多于戰火而傷亡者。二戰期間估計因瘧疾死亡12,000,000人天數且在越戰期間死亡120萬人天數。

瘧原蟲寄生蟲通過受感染雌瘧蚊(Anopheles)的叮咬和吸血進行傳播，所述瘧蚊從黎明活動到黃昏。處于子孢子發育階段的瘧原蟲主要通過血流從叮咬位點遷移到肝，其在肝細胞內繁殖，在惡性瘧原蟲情形下在每個受感染細胞中產生約10,000到個40,000個子代。所述肝階段寄生蟲表達一些在子孢子階段不表達的蛋白質。在所述階段時，寄生蟲以裂殖子形式重新進入血流，從而表達一些與在子孢子階段和肝早期階段表達的蛋白質不同的蛋白質，并且侵入紅細胞，其中額外繁殖每48小時將寄生蟲數增加約10到20倍。與在肝中發育5到10天(其不誘發瘧疾的任何癥狀或體征)不同，未治療的血液階段感染會引發溶血、寒顫、發熱和虛脫。惡性瘧原蟲是引發人類疾病的最危險的四個主要瘧原蟲種類(間日瘧原蟲、三日瘧原蟲和卵形瘧原蟲[諾氏瘧原蟲也可引發人類疾病])，在惡性瘧原蟲情形下，所述疾病伴有微循環血流受到破壞和重要器官(例如腦、腎和肺)代謝變化，如果不緊急治療經常會導致死亡。

針對惡性瘧原蟲瘧疾的有效疫苗仍為醫學的最大挑戰之一。盡管一百多年來醫生和科學家們已花費數億美元進行畢生努力研究，并且發現了許多有前景的實驗疫苗，但是仍然沒有可減輕人類重大傳染病中任一者的市售疫苗。

一代人以前，公共健康倡導采用氯喹(chloroquine)、DDT和媒介控制計劃，這似乎可在世界范圍內降低惡性瘧疾的威脅。有效疫苗的缺乏使這些努力難以奏效，但可持續控制似乎即將達成。

即將成功的承諾很快就失敗了，并且失敗的原因是多方面的。寄生蟲對可負擔的高效抗瘧藥物的抗性越來越強，媒介控制措施失效，并且在發展中國家的病區，遷移、戰爭和經濟崩潰越來越常見。因此，惡性瘧原蟲瘧疾再度猖獗，每年使至少25億人有患病危險，使3億到9億人感染，并殺死100萬到300萬人。在困擾發展中國家的許多社會、經濟、環境和政治問題中，惡性瘧原蟲瘧疾逐漸被視作是這些不公正的根源和殘酷結果，并且是解決這些復雜問題的巨大障礙。在發展中國家，不利用有效疫苗是不可能控制惡性瘧原蟲瘧疾的。實際上，考慮到社會、政治和經濟現實，我們相信疫苗可成為可持續控制計劃的基本組份，并且在全球根除運動中將需要疫苗。