偷拍一区二区三区_亚洲欧美日韩偷拍_亚洲第一免费网站_99精品视频在线免费观看_久久亚洲精品国产_国产成人无码一二三区视频_欧美激情xxxxx_国产精品毛片高清在线完整版_一色道久久88加勒比一_一区二区欧美久久_五月婷婷六月婷婷_国产精品成人久久久久

[發明專利]一種重組多主枝孢霉變應原Cla h8蛋白的制備方法及其用途無效

專利信息
申請號: 201010141209.1 申請日: 2010-04-02
公開(公告)號: CN102212531A 公開(公告)日: 2011-10-12
發明(設計)人: 付永鋒;程訓佳;馮萌 申請(專利權)人: 復旦大學
主分類號: C12N15/31 分類號: C12N15/31;C12N15/63;C07K14/37;A61K38/16;A61P37/08;G01N33/53
代理公司: 上海正旦專利代理有限公司 31200 代理人: 吳桂琴
地址: 20043*** 國省代碼: 上海;31
權利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關鍵詞: 一種 重組 主枝 霉變 cla h8 蛋白 制備 方法 及其 用途
【權利要求書】:

1.一種重組多主枝孢霉變應原蛋白Cla?h8的制備方法,其特征在于,其包括如下步驟:

1)從培養的多主枝孢霉菌體中提取總RNA,通過RT-PCR合成cDNA;

2)合成引物:

Cla?h8-S?5-CCCATATGCCTGGCCAGCAAGCAA-3

Cla?h8-as?5-CGGGATCCTTATCTGGTGGTGTAACCA-3

3)以cDNA為模板,通過PCR獲得多主枝孢霉變應原蛋白Cla?h8編碼基因片段;

4)將編碼基因克隆入表達載體中,轉化宿主菌,培養所得重組工程菌,然后誘導其表達目的蛋白;

5)采用緩沖液對rCla?h8包涵體進行洗滌,將其提純后,采用谷胱甘肽還原系統對其復性,獲得重組多主枝孢霉變應原蛋白Cla?h8;

6)免疫學方法鑒定重組多主枝孢霉變應原蛋白Cla?h8免疫原性。

2.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,所述步驟3)中,Cla?h8編碼基因如SEQID?No:1所示;所編碼的氨基酸序列如SEQ?ID?No:2所示。

3.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,所述步驟4)的表達載體不限于特定的表達載體,只要它能夠與所述cDNA基因重組,形成適宜表達質粒。

4.根據權利要求1或3所述的方法,其特征在于,所述的表達載體為原核表達載體。

5.根據權利要求1或3所述的方法,其特征在于,所述的表達載體為pET19b。

6.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,所述步驟4)的宿主菌不局限于任何特定的宿主細胞,只要它能夠表達所述重組表達載體。

7.根據權利要求6所述的方法,其中所述的宿主細胞為大腸桿菌BL21?StarTM(DE3)pLysS。

8.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,所述步驟4)中,宿主菌的培養基是LB液體培養基,培養溫度是20~37℃,培養時間6~16小時。

9.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,所述步驟4)中,菌體達到合適的濃度后用IPTG誘導表達,誘導條件為:IPTG濃度為0.1~1mM,誘導溫度為20~37℃,誘導時間為2~16小時。

10.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,所述步驟5)中的純化方法為:將多主枝孢霉變應原蛋白Cla?h8表達工程菌在37℃誘導3小時后,離心收集菌體,置于冰上超聲裂解,然后加入溶菌酶30℃振搖30分鐘,離心,收集包涵體蛋白沉淀,以Novagen公司的refolding?kit對包涵體蛋白進行提純與復性后,14000rmp離心20分鐘,收集上清,冰箱保存。

11.權利要求1的方法制得的重組多主枝孢霉變應原蛋白Cla?h8在制備診斷與治療多主枝孢霉引起的過敏性疾病制劑中的用途。

下載完整專利技術內容需要扣除積分,VIP會員可以免費下載。

該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息,商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于復旦大學,未經復旦大學許可,擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作,請聯系【客服

本文鏈接:http://www.17sss.com.cn/pat/books/201010141209.1/1.html,轉載請聲明來源鉆瓜專利網。

×

專利文獻下載

說明:

1、專利原文基于中國國家知識產權局專利說明書;

2、支持發明專利 、實用新型專利、外觀設計專利(升級中);

3、專利數據每周兩次同步更新,支持Adobe PDF格式;

4、內容包括專利技術的結構示意圖流程工藝圖技術構造圖

5、已全新升級為極速版,下載速度顯著提升!歡迎使用!

請您登陸后,進行下載,點擊【登陸】 【注冊】

關于我們 尋求報道 投稿須知 廣告合作 版權聲明 網站地圖 友情鏈接 企業標識 聯系我們

鉆瓜專利網在線咨詢

周一至周五 9:00-18:00

咨詢在線客服咨詢在線客服
tel code back_top
欧美主播一区二区三区| 成人免费av在线| 日韩一级理论片| 色婷婷av一区二区三区软件| 日韩精品无码一区二区三区免费| 精品久久久久久亚洲综合网 | 成人性生活毛片| 日韩在线观看网站| 伊人365影院| 中文国产亚洲喷潮| 成人免费毛片嘿嘿连载视频| 后入内射无码人妻一区| 视频一区二区在线| 最新国产成人av网站网址麻豆| 国产91精品露脸国语对白| 日本69式三人交| 欧美黄色片免费观看| 麻豆精品视频在线| 欧美午夜精品久久久久免费视 | 91在线精品一区二区| 男插女视频网站| 亚洲成av人片在线| 特黄特色免费视频| 国产精品久久久久久久久久久久久久| 一区二区三区中文在线观看| 午夜天堂在线视频| 亚洲第一在线视频| 亚洲黄色一区二区| 日韩美女毛茸茸| 在线观看国产小视频| 一本久道久久综合| 亚洲精品美女视频| 久久久久久久综合色一本| 久热这里只有精品6| 国产精品动漫网站| 欧美黄色免费网站| 亚洲乱码中文字幕综合| 免费一级suv好看的国产网站| 奇米影视亚洲狠狠色| 无码精品在线观看| www成人免费| 欧美精品一区二| 国产无遮挡又黄又爽又色视频| 欧美丰满少妇xxxxx| 久久国产精品免费| 激情五月深爱五月| 超碰97在线播放| 久久99国产乱子伦精品免费| 波多野结衣天堂| 亚洲香蕉av在线一区二区三区| 日本二区在线观看| 5g国产欧美日韩视频| 日本二三区不卡| 国产黑丝在线一区二区三区| 在线观看亚洲欧美| 一本一道久久a久久综合蜜桃| 国产精品12| 亚洲伦理中文字幕| 久久久久久久久岛国免费| 国精产品视频一二二区| 国产精品国产自产拍高清av水多| 久久在线观看免费| 性高潮免费视频| 8x拔播拔播x8国产精品| 99久久婷婷国产综合精品电影| 热舞福利精品大尺度视频| 2020国产精品久久精品美国| 国产精品无码一区二区在线| 日韩精品亚洲元码| 日韩成人午夜精品| 精品乱子伦一区二区三区| 欧美三级一区二区| 黄色片网站免费在线观看| 成人免费毛片糖心| 亚洲人成色77777| 国产精品一区二区三区久久| 亚洲天堂av综合网| 97精品国产露脸对白| zzjj国产精品一区二区| 亚洲色偷精品一区二区三区| 美女洗澡无遮挡| 亚洲淫片在线视频| 亚洲欧美中文日韩v在线观看| 国产成人av网站| 小早川怜子一区二区三区| 超碰91人人草人人干| 不卡的av电影| 伊人久久久久久久久久久久久久| 国产成人精品免费久久久久| 激情综合色综合久久| 五月婷六月丁香| 97免费视频观看| 欧美专区福利在线| 国产精品免费视频一区| 国产午夜免费视频| 视频一区亚洲| 在线不卡中文字幕播放| 久久一区精品| 精品熟妇无码av免费久久| 污污视频网站免费观看| 日本一道在线观看| 国内视频一区| 国产精品aaaa| 亚洲美女久久久| 欧美丝袜丝交足nylons图片| 国内精品国产三级国产a久久| 免费成人深夜夜行p站| 成人免费91在线看| 亚洲成人在线网| 成人黄色在线看| 欧美成人精品激情在线视频| 久久精品人成| 亚洲欧美999| 日韩欧美在线播放| 成人欧美一区二区三区白人 | 国产在线国偷精品产拍免费yy | 国产精品免费观看久久| 国产成人精品免高潮在线观看| 91精品国产综合久久久久久漫画| 亚洲欧美日韩国产成人精品影院 | 日韩wuma| 91最新在线免费观看| 欧美放荡办公室videos4k| 91精品国产91久久综合桃花| 91片在线免费观看| 国产又粗又猛视频免费| 手机看片福利日韩| 精品一区2区三区| 亚洲欧美国产精品| 亚洲va国产天堂va久久en| 国产亚洲欧美在线精品| www.日本在线视频| 亚洲综合日韩中文字幕v在线| 欧美日韩第一页| 日韩一区二区麻豆国产| 91色乱码一区二区三区| 亚洲专区在线播放| 一起草最新网址| 91国产视频在线播放| 91精品国产色综合久久| 亚洲无线码一区二区三区| 亚洲免费av网站| 国产精品三级电影| 亚洲国产精品传媒在线观看| 99久久精品国产一区| 久久精品国产精品青草| 无码精品在线观看| 伊人久久综合视频| 国产精品偷伦视频免费观看了| 97超级碰碰人国产在线观看| 日韩免费看网站| 久久综合久久久久88| 丰满少妇高潮在线观看| 日韩影视一区二区三区| 美脚丝袜一区二区三区在线观看| 亚洲人高潮女人毛茸茸| 亚洲精品98久久久久久中文字幕| 欧美日韩激情一区二区| 成人成人成人在线视频| 欧美一级性视频| 国产亚洲精品久久久久久打不开| 韩国黄色一级大片| 欧美黄网免费在线观看| 精品中文视频在线| 精品日韩欧美在线| 欧美成人性战久久| 亚洲精品mp4| 亚洲日韩欧美视频| 在线播放精品一区二区三区 | 成人黄色一级大片| 成人性做爰片免费视频| 91入口在线观看| 亚洲欧美中文字幕| 91成人在线观看喷潮| 久久久精品欧美丰满| 日韩电影一区二区三区四区| 亚洲成人生活片| 男女日批视频在线观看| 日韩免费观看高清| **欧美日韩vr在线| 国产精品成人一区二区| 成人性生交大片免费看小说| 日韩视频永久免费观看| 欧美精品一区二区三区蜜臀| 欧美在线免费观看视频| 国产乱码精品1区2区3区| 日韩欧美性视频| 国产高清视频免费在线观看| 国产精品20p| 免看一级a毛片一片成人不卡| 国产成人愉拍精品久久 | 在线能看的av网站| 韩国女同性做爰三级| 久青草视频在线观看| 天天爽夜夜爽夜夜爽精品| 7777久久亚洲中文字幕| 福利网址在线观看| 99精品久久久久| 国产精品麻豆一区| 亚洲视频在线不卡| 国产又猛又黄的视频| 国产精品三级一区二区| 欧美日韩天天操| 欧美专区中文字幕| 亚洲精品色婷婷福利天堂| 亚洲国产99精品国自产| 亚洲嫩模很污视频| 久久福利视频网| 日韩中文av在线| 国产精品白丝在线| 久久影音资源网| 日韩高清欧美激情| 五月婷婷激情网| 亚洲天堂av片| 91狠狠综合久久久| 日韩三级免费看| 午夜精品久久久久久久第一页按摩| 青青草成人在线观看| 国产精品三级久久久久三级| 激情久久av一区av二区av三区| 日韩欧美色电影| 最好看的2019年中文视频 | 国产区亚洲区欧美区| 日韩**中文字幕毛片| 26uuu日韩精品一区二区| 欧美日韩国产成人| 三级精品视频久久久久| 亚洲福利精品在线| 日韩精品中文字幕有码专区| 欧美一区二区三区影视| 婷婷丁香久久五月婷婷| 国产精品成人免费在线| 亚洲国产精品人人做人人爽| 欧美优质美女网站| 亚洲精品网站在线播放gif| 欧美精品日韩一区| 日韩欧美色综合| 国产午夜精品视频| 欧美精品一区二区三区视频| 在线亚洲+欧美+日本专区| 日韩一区二区免费高清| 精品久久久久久久久久久久久久久| 久久精品成人欧美大片| 国产伦精品一区二区三区高清版 | 亚洲熟女少妇一区二区| 一级黄色大片网站| 日韩激情视频网站| 国产精品全国免费观看高清| 亚洲女女做受ⅹxx高潮| 欧美日韩国产综合新一区| 福利视频导航一区| 精品日本高清在线播放| 欧美日韩国产小视频在线观看| 欧美亚洲一区二区三区四区| 亚洲国产中文字幕在线观看| 久久亚洲精品网站| 久久偷看各类女兵18女厕嘘嘘| 日韩激情视频在线播放| 欧美成人一区二区三区在线观看| 欧美日韩视频第一区| 色噜噜狠狠成人中文综合| 日韩欧美国产免费播放| 精品欧美一区二区三区精品久久| 中文字幕视频在线免费欧美日韩综合在线看 | 久久久久久久午夜| 日本美女bbw| 国产jzjzjz丝袜老师水多| 日本一区二区三区免费乱视频| 欧美视频中文字幕| 亚洲天堂男人天堂| 日本乱人伦a精品| 久久精品国产一区二区三区日韩 | 亚洲欧美一二三区| 一级成人免费视频| 久久国产夜色精品鲁鲁99| 久久久久久久综合| 不卡一二三区首页| 波多野结衣中文字幕一区二区三区| 成人在线视频首页| 久久综合999| 国产精品免费视频一区| 色系网站成人免费| 精品区一区二区| 久久久天堂国产精品女人| 2020国产精品视频| 国产精品手机在线| 91淫黄看大片| 亚洲精品中文字幕在线播放| 成人爽a毛片一区二区| 午夜电影久久久| 97碰碰碰免费色视频| 大荫蒂性生交片| 日韩aaaaaa| 26uuu精品一区二区在线观看| 精品噜噜噜噜久久久久久久久试看| 亚洲在线免费视频| 国产又黄又大又粗视频| 亚洲精品国产91| 欧美日韩 一区二区三区| 亚洲欧美自偷自拍| 日本一二三不卡| 亚洲午夜视频在线| 欧美巨大另类极品videosbest | caoporn国产一区二区| 国产日韩在线不卡| 亚洲6080在线| 日韩欧美一级二级| 萌白酱国产一区二区| 久久99国产精品99久久| xxww在线观看| 成人性生活毛片| 中文字幕在线观看高清| 国产精品主播直播| 欧美影院一区二区三区| 国产精品99久久久久久人| 成人性生生活性生交12| 在线观看一二三区| 香蕉成人伊视频在线观看| 日韩av成人在线观看| 精品人妻二区中文字幕| 日韩精品欧美精品| 欧美日韩小视频| 国产精品加勒比| 久久久老熟女一区二区三区91| 一级特黄aaa大片在线观看| www国产精品av| 日韩一区二区影院| 国内精品美女av在线播放| 日韩免费av一区二区三区| 欧洲美女亚洲激情| 欧美黄色免费观看| 国产mv日韩mv欧美| 日韩免费视频一区二区| 欧美成人免费小视频| 成人观看高清在线观看免费| japanese在线视频| 日批在线观看视频| av片免费观看| 狠狠狠色丁香婷婷综合久久五月| 自拍偷拍亚洲激情| 久久九九免费视频| 亚州欧美一区三区三区在线| 免费无码一区二区三区| 手机在线看片1024| 国产日韩欧美不卡| 国产香蕉精品视频一区二区三区| 日本精品在线视频| 苍井空张开腿实干12次| 国产精品911| 在线观看国产精品91| 黄色一级片网址| 日韩国产亚洲欧美| 色视频成人在线观看免| 成人免费在线视频网站| 91久久免费视频| 99久久婷婷国产综合精品电影| 精品国模在线视频| 欧洲一区二区在线| 亚洲女人久久久| 99久久精品国产网站| 日韩一区二区三区视频在线观看| 91精品视频在线| 国模大尺度视频| 国产自产一区二区| 日韩欧美第一页| 国产日韩在线一区| 9久久婷婷国产综合精品性色| 国产三级av在线播放| 蜜桃在线一区二区| 亚洲第一主播视频| 欧美猛交免费看| 日本精品视频一区| 色欲av无码一区二区三区| a天堂视频在线| 欧美中文字幕一区二区三区| 国产欧美一区二区三区久久人妖| 一区二区三区四区影院| 国产高清免费av| 精品国产91久久久| 91入口在线观看| 国产不卡一二三| 99re66热这里只有精品3直播 | 欧美日本在线视频| 免费不卡亚洲欧美| 日韩成年人视频| 精品欧美一区二区三区| 欧美精品123| 欧美在线观看不卡| 午夜电影网一区| 91超碰在线免费观看| 中国美女乱淫免费看视频| 免费在线成人网| 亚洲精品第一页| 天天爽天天狠久久久| 免费黄色激情视频| 国产精品自产自拍| 久久亚洲精品成人| 欧美精品自拍视频| 波多野结衣电车| 亚洲色图视频网| 97色在线视频观看| 99草草国产熟女视频在线| 99久久精品国产成人一区二区| 亚洲国产一区二区三区青草影视| 91精品国产色综合| 午夜啪啪小视频| 久久久成人网| 亚洲国产精品久久久久| 欧美午夜小视频| a视频免费在线观看|