[發明專利]一種多靶點抗癌腺病毒的構建和用途無效
| 申請號： | 200910067756.7 | 申請日： | 2009-01-21 |
| 公開（公告）號： | CN101565692A | 公開（公告）日： | 2009-10-28 |
| 發明（設計）人： | 張慶瑜;康春生;浦佩玉;張春智;付彥超;張靖;王濤 | 申請（專利權）人： | 天津醫科大學總醫院 |
| 主分類號： | C12N7/01 | 分類號： | C12N7/01;C12N15/861;A61K48/00;A61P35/00;C12R1/93 |
| 代理公司： | 天津佳盟知識產權代理有限公司 | 代理人： | 侯 力 |
| 地址： | 300052*** | 國省代碼： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 多靶點 抗癌 病毒 構建 用途 | ||
1、一種基于反義RNA技術的、以腫瘤細胞Akt1、PI3K?p85亞基和COX-2為藥靶的抗癌重組腺病毒，其特征是在病毒載體基因組多克隆位點下游分別插入針對人源性和小鼠源性U6啟動子，在U6啟動子下游連接反義的Akt1、PI3K?p85亞基和COX-2插入序列的表達模扳構成。
2、根據權利要求1所述的重組腺病毒，其特征在于所述的病毒載體是腺病毒載體。
3、根據權利要求2所述的重組腺病毒，其特征在于所述的腺病毒載體是pGSadeno腺病毒載體。
4、根據權利要求1所述的重組腺病毒，其特征在于所述的反義的Akt1、PI3K?p85亞基和COX-2RNA序列采用：序列表中的SEQ?ID?NO.1/SEQ?ID?NO.2，SEQ?ID?NO.1為正義鏈，SEQ?ID?NO.2為反義鏈；SEQ?ID?NO.3/SEQ?ID?NO.4，SEQ?ID?NO.3為正義鏈，SEQID?NO.4為反義鏈；SEQ?ID?NO.5/SEQ?ID?NO.6，SEQ?ID?NO.5為正義鏈，SEQ?ID?NO.6為反義鏈。
5、一種權利要求1所述的重組腺病毒的構建方法，其特征在于包括：
第一、將序列表中的SEQ?ID?NO.1/SEQ?ID?NO.2、SEQ?ID?NO.3/SEQ?ID?NO.4、SEQID?NO.5/SEQ?ID?NO.6退火形成雙鏈結構，通過亞克隆連接于質粒載體用以構建真核表達質粒，獲得以腫瘤細胞Akt1、PI3K?p85亞基和COX-2為藥靶的抗癌重組質粒。
第二、將上步得到的真核表達質粒通過亞克隆連接于穿梭載體：LR體外同源重組至腺病毒載體，線性化腺病毒DNA后轉染293包裝細胞，獲得以腫瘤細胞Akt1、PI3K?p85亞基和COX-2為藥靶的抗癌重組腺病毒。
6、根據權利要求5所述的方法，其特征在于所述的腺病毒載體是pGSadeno腺病毒載體。
7、權利要求1所述的重組腺病毒在制備抑制腫瘤生長藥物中的應用。
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