[發(fā)明專利]一種用于mtDNA等位基因分型及點(diǎn)突變檢測(cè)的ARMS-PCR方法無(wú)效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 200910042411.6 | 申請(qǐng)日： | 2009-01-05 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN101768635A | 公開(kāi)（公告）日： | 2010-07-07 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 朱敏;胡維新;周鋼;黃河 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 中南大學(xué) |
| 主分類號(hào)： | C12Q1/68 | 分類號(hào)： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 中南大學(xué)專利中心 43200 | 代理人： | 胡奕 |
| 地址： | 410083*** | 國(guó)省代碼： | 湖南;43 |
| 權(quán)利要求書(shū)： | 查看更多 | 說(shuō)明書(shū)： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 用于 mtdna 等位基因 突變 檢測(cè) arms pcr 方法 | ||
1.一種用于mtDNA等位基因分型及點(diǎn)突變檢測(cè)的ARMS-PCR方法，依次包括ARMS引物設(shè)計(jì)、ARMS-PCR擴(kuò)增、瓊脂糖凝膠電泳、根據(jù)陽(yáng)性反應(yīng)確定基因型的步驟，其特征在于：所述特異性ARMS適配引物設(shè)計(jì)步驟中，引物3’末端終止在待診位點(diǎn)，在上游或下游ARMS引物3’倒數(shù)3-4位增加設(shè)置兩個(gè)連續(xù)的堿基錯(cuò)配，錯(cuò)配方式為A-T或G-C的互換；所述ARMS-PCR擴(kuò)增時(shí)增加模板mtDNA為常規(guī)用量的2~10倍。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述ARMS適配引物為兩對(duì)引物，共用上游引物，兩條下游引物分別在3’末端與待診位點(diǎn)堿基匹配和錯(cuò)配，兩條下游引物均在3’末端倒數(shù)3-4位增加兩個(gè)連續(xù)的堿基錯(cuò)配。
3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述ARMS適配引物為兩對(duì)引物，共用下游引物，兩條上游引物分別在3’末端與待診位點(diǎn)堿基匹配和錯(cuò)配，兩條上游引物均在3’末端倒數(shù)3-4位增加兩個(gè)連續(xù)的堿基錯(cuò)配。
4.如權(quán)利要求1~3所述之一的方法在檢測(cè)mtDNA基因突變中的應(yīng)用。
5.如權(quán)利要求1~3所述之一的方法在檢測(cè)mtSNPs中的應(yīng)用。
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