[發明專利]小鼠Akt1基因啟動子熒光素酶質粒的構建方法無效
| 申請號： | 200810155962.9 | 申請日： | 2008-10-14 |
| 公開（公告）號： | CN101724642A | 公開（公告）日： | 2010-06-09 |
| 發明（設計）人： | 楊中州;呂鏜烽;沈小昆;宋勇 | 申請（專利權）人： | 南京大學 |
| 主分類號： | C12N15/66 | 分類號： | C12N15/66 |
| 代理公司： | 南京知識律師事務所 32207 | 代理人： | 黃嘉棟 |
| 地址： | 210093 江蘇省*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 小鼠 akt1 基因 啟動子 熒光 質粒 構建 方法 | ||
1.一種小鼠Akt1基因啟動子熒光素酶質粒的構建方法，其特征是它包括下列步驟：
(1)將包含小鼠Akt1基因啟動子片段插入pBluescriptIISKM(pBS)載體的XbaI位點間，構建包含小鼠Akt1基因啟動子片段的pBS/XbaI4.5質粒；
(2)將包含小鼠Akt1基因第一編碼外顯子ATG片段插入pBluescriptIISKM載體的NotI位點間，構建包含小鼠Akt1基因第一編碼外顯子片段的pBS/LA1.9質粒；
(3)將小鼠Akt1基因啟動子插入pGL3-basic載體的SamI和NcoI位點間，構建小鼠Akt1基因啟動子熒光素酶質粒pGL3/mAkt1-pro。
2.根據權利要求1所述的構建方法，其特征是：通過探針檢測小鼠Akt1基因啟動子序列，其擴增核苷酸序列如SEQ?ID?NO：1所示。
3.根據權利要求1所述的構建方法，其特征是：所述構建包含小鼠Akt1基因啟動子片段的真核表達載體為pBluescriptIISKM，小鼠Akt1基因啟動子核苷酸序列如SEQ?IDNO：2所示。
4.根據權利要求1所述的構建方法，其特征是：所述構建包含小鼠Akt1基因第一編碼外顯子ATG片段的真核表達載體為pBluescriptIISKM，其擴增核苷酸序列如SEQ?IDNO：3所示。
5.根據權利要求1所述的構建方法，其特征是：所述構建小鼠Akt1基因啟動子的真核表達載體為pGL3-basic，小鼠Akt1基因啟動子熒光素酶質粒核苷酸序列如SEQ?IDNO：4所示。
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