[發明專利]前列腺酸性磷酸酶化學發光免疫分析測定試劑盒及其制備方法無效
| 申請號: | 200810103269.7 | 申請日: | 2008-04-02 |
| 公開(公告)號: | CN101368962A | 公開(公告)日: | 2009-02-18 |
| 發明(設計)人: | 石根;應希堂;胡國茂;鄭金來;唐寶軍;于尚永 | 申請(專利權)人: | 北京科美東雅生物技術有限公司 |
| 主分類號: | G01N33/577 | 分類號: | G01N33/577;G01N33/573;G01N21/76 |
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| 地址: | 100094北京市*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 前列腺 酸性磷酸酶 化學 發光 免疫 分析 測定 試劑盒 及其 制備 方法 | ||
1.一種前列腺酸性磷酸酶化學發光免疫分析測定試劑盒,其特征在于,所述試劑盒包括:前列腺酸性磷酸酶校準品;前列腺酸性磷酸酶單克隆抗體包被的固相載體;酶標記的前列腺酸性磷酸酶單克隆抗體;上述酶所作用的化學發光底物;以及洗滌液。
2.如權利要求1所述的試劑盒,其特征在于,所述固相載體為微孔板、塑料珠或塑料管。
3.如權利要求1所述的試劑盒,其特征在于,所述酶為堿性磷酸酶或辣根過氧化物酶。
4.一種制備權利要求1所述試劑盒的制備方法,其特征在于包括以下步驟:前列腺酸性磷酸酶校準品的配制;在固相載體上包被前列腺酸性磷酸酶單克隆抗體;在前列腺酸性磷酸酶單克隆抗體上標記酶;濃縮洗滌液的配制;上述各半成品組分的分裝以及組裝為成品。
5.如權利要求4所述的方法,其特征在于,所述包被固相載體包括以下步驟:
I)包被
可采用0.05mol/L?pH值為9.6的碳酸鹽緩沖液與適當濃度的前列腺酸性磷酸酶單抗混合制成包被液,并將其負載于固相載體上;
II)用生理鹽水洗滌上述固相載體;以及
III)封閉
配制封閉液,基于1000mL所述封閉液包含0.2g?NaH2PO4·2H2O、2.9gNaH2PO4·12H2O、10g?BSA和1mLProclin300,所述封閉液的pH值為7.0~7.4,然后將所得封閉液負載于上述洗滌后的固相載體上。
6.如權利要求4所述的方法,其特征在于,所述酶為堿性磷酸酶或辣根過氧化物酶。
7.如權利要求4所述的方法,其特征在于,所述化學發光底物為1,2-二氧乙烷類衍生物、魯米諾或異魯米諾。
8.如權利要求7所述的方法,其特征在于,所述1,2-二氧乙烷類衍生物為(金剛烷)-1,2-二氧乙烷、3-(2′-螺旋金剛烷)-4-甲氧基-4-(3″-磷酰氧基)苯基-1,2-二氧乙烷、CSPD或CDP-Star。
9.如權利要求7所述的方法,其特征在于,所述魯米諾或異魯米諾為A液和B液組成。
10.如權利要求9所述的方法,其特征在于,所述化學發光底物A液,包括10mmol/L魯米諾、0.3mmol/L?4-羥基聯苯、0.05mmol/L?4-碘苯硼酸、0.2mol/LpH8.7硼酸-硼砂緩沖液,其pH值為8.0~10.0;所述化學發光底物B液,包括3.5mmol/L過氧化脲、0.1%?Tween20、0.2mol/L?pH7.2磷酸鹽緩沖液,其pH值為7.0~7.6。
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