[發明專利]一種液體深層發酵生產角蛋白酶的方法有效
| 申請號: | 200810060639.3 | 申請日: | 2008-04-15 |
| 公開(公告)號: | CN101260393A | 公開(公告)日: | 2008-09-10 |
| 發明(設計)人: | 李永泉;呂龍賢;管文軍;沈鈱豪 | 申請(專利權)人: | 浙江大學 |
| 主分類號: | C12N9/50 | 分類號: | C12N9/50;C12R1/01 |
| 代理公司: | 杭州求是專利事務所有限公司 | 代理人: | 張法高 |
| 地址: | 310027*** | 國省代碼: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 液體 深層 發酵 生產 角蛋白 方法 | ||
1、一種液體深層發酵生產角蛋白酶的方法,其特征在于包括如下步驟:
1)采用涂布或劃線的方法將粘金黃桿菌接種到斜面培養基上,于18~37℃復壯培養18~36小時,得到復壯菌體;
2)將復壯菌體接種到液體種子培養基中,于18~37℃,100~300rpm條件下培養18~36小時,得到發酵種子;
3)將發酵種子按發酵培養基體積的5~15%接入發酵罐中,罐溫18~37℃、罐壓0.2~0.8kg/cm2,攪拌速率100~300rpm,通氣量為1∶0.3~2.0,發酵培養時間18~60小時。
2.根據權利要求1所述的一種液體深層發酵生產角蛋白酶的方法,其特征在于所述的粘金黃桿菌為Chryseobacterium?L99,保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,保藏號為CGMCC?No.2295。
3.根據權利要求1所述的一種液體深層發酵生產角蛋白酶的方法,其特征在于所述的斜面培養基的成份為:每1000毫升中含NaCl5~15克、酵母粉或酵母膏5~10克、蛋白胨5~15克、瓊脂粉10~20克和水900~1000毫升。
4.根據權利要求1所述的一種液體深層發酵生產角蛋白酶的方法,其特征在于所述的種子培養基的成份為:每1000毫升中含NaCl5~15克、酵母粉或酵母膏5~10克、蛋白胨5~15克和水900~1000毫升。
5.根據權利要求1所述的一種液體深層發酵生產角蛋白酶的方法,其特征在于所述的發酵培養基的成份為:每1000毫升中含可溶性淀粉0.1~100克、蔗糖0.1~100克、葡萄糖0.1~100克、酪蛋白0.1~100克、酵母粉或酵母膏0.1~100克、蛋白胨0.1~100克、角蛋白0.1~200克、K2PO4?0.1~10克、NaH2PO4·2H2O0.1~10克、MgCl2·6H2O?0.1~5克和水900~1000毫升。
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