1.一種在同一標本上檢測同一抗原表達的方法，其步驟是：

(1)石蠟包埋組織脫蠟、水化、TBS沖洗2～4次，每次3min，然后進行第(2)步，其中TBS為0.01M?pH7.4TBS溶液：三羥基氨基甲烷1.21g，氯化鈉7.6g，加蒸餾水調至1000ml，濃鹽酸調pH值為7.4；培養細胞固定后，加入TBS沖洗2～4次，每次3min，然后加入通透液：0.1％Triton-X?100，室溫孵育5-10min，最后TBS沖洗2～4次，每次3min，進行第(3)步；

(2)0.01M?pH6.0檸檬酸緩沖液，微波或高壓進行抗原修復，冷卻至室溫，TBS沖洗2～4次，每次3min，其中0.01M?pH6.0檸檬酸緩沖液按下述方法配制，A液：0.1M檸檬酸：檸檬酸21.0g，加蒸餾水調至1000ml，濃鹽酸調pH值為6.0；B液：0.1M檸檬酸鈉液：檸檬酸鈉29.41g，加蒸餾水調至1000ml，使用時，取A液1.9ml，B液8.1ml，加蒸餾水90ml；

(3)滴加2％BSA牛血清白蛋白封閉緩沖液，即2g?BSA溶于100ml?TBS溶液中，37℃濕盒孵育30～35min；

(4)滴加待檢測的一抗，37℃濕盒孵育1～2小時或4℃冰箱過夜，TBS-T漂洗3min/次×(2～4)次，其中TBS-T為在TBS溶液里加入Tween?20，使后者的終濃度為0.05％；

(5)滴加2％BSA封閉緩沖液，37℃濕盒孵育10～15min；

(6)滴加生物素化羊抗兔或羊抗鼠IgG，37℃濕盒孵育30min，TBS-T漂洗3min/次×(2～4)次；

(7)滴加2％BSA封閉緩沖液37℃濕盒孵育10～15min；

(8)滴加用2％BSA封閉緩沖液稀釋的量子點標記的鏈霉親和素復合物，工作濃度：1∶50～200，37℃濕盒孵育30～60min，TBS-T漂洗3min/次×(2～4)次；

(9)滴加50％甘油封片，上熒光顯微鏡用不同波長激發量子點，以細胞內出現橙紅色的熒光顆粒為陽性；

(10)標本自發熒光對照：標本只加TBS或緩沖甘油封片，熒光顯微鏡觀察組織內有熒光，為自發熒光，陽性對照：用已知陽性標本做直接法免疫熒光組織化學染色，結果應呈陽性熒光；

(11)2-8℃保存，2-4周后發現熒光信號減弱，待檢標本置于TBS中浸泡5～15min，直至蓋玻片自然脫落；

(12)加入辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素，37℃濕盒孵育15～20min，TBS漂洗3min/次×(2～4)次；

(13)DAB顯色，觀察結果，觀察到待檢抗原的定位與免疫熒光法一致。