[發明專利]一種生產5’－呈味核苷酸的方法無效
| 申請號： | 200710038635.0 | 申請日： | 2007-03-29 |
| 公開（公告）號： | CN101063126A | 公開（公告）日： | 2007-10-31 |
| 發明（設計）人： | 梁勝華 | 申請（專利權）人： | 復旦大學 |
| 主分類號： | C12N15/09 | 分類號： | C12N15/09;C12N9/12;C12P19/30 |
| 代理公司： | 上海正旦專利代理有限公司 | 代理人： | 陸飛;盛志范 |
| 地址： | 20043*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 生產 核苷酸 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種生產5’-呈味核苷酸的方法，其特征在于包括如下步驟：
1.1利用重組DNA技術，構建酸性磷酸酶表達載體，并轉化大腸桿菌，得到高效表達酸性磷酸酶的基因工程菌；所述的酸性磷酸酶來源于產氣腸桿菌，其核苷酸序列為SEQ.ID.NO.1，氨基酸序列為SEQ.ID.NO.2；
1.2酸性磷酸酶基因的突變與篩選對核苷具有較高親和性的酸性磷酸酶；該突變型酸性磷酸酶的核苷酸序列為SEQ.ID.NO.3，氨基酸序列為SEQ.ID.NO.4；
1.3以對核苷具有較高親和性的酸性磷酸酶催化核苷與磷酸基團供體合成5’-呈味核苷酸；
其中，所述的核苷為肌苷，所述的磷酸基團供體為焦磷酸鹽。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟1.3中反應溫度為20-50℃，緩沖液的pH值為2.5-6，反應底物中核苷濃度為10-200mM，磷酸基團供體濃度為核苷濃度的1-10倍，反應時間為1-20小時。
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