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[發明專利]新的水痘病毒毒株、水痘減毒活疫苗及其制備方法有效

專利信息
申請號: 200610083049.3 申請日: 2006-05-29
公開(公告)號: CN101082041A 公開(公告)日: 2007-12-05
發明(設計)人: 李秀玲;王桂秋;王用楫;章以浩;項金忠;許麗鋒;彭佩霞;龐成華;謝云;張晨;劉立新 申請(專利權)人: 北京生物制品研究所
主分類號: C12N7/00 分類號: C12N7/00;C12N15/38;C12N7/04;A61K39/25
代理公司: 北京天昊聯合知識產權代理有限公司 代理人: 丁業平;張天舒
地址: 100024北*** 國省代碼: 北京;11
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摘要:
搜索關鍵詞: 水痘 病毒 減毒活 疫苗 及其 制備 方法
【權利要求書】:

1.一種水痘-帶狀皰疹病毒(Varicella-Zoster?virus)株,其保藏編號為CGMCC?No.1618;其基因組中的R2可變區重復單位的拷貝數為7個,R4可變區重復單位的拷貝數為9個,R5可變區為1個;其基因組全長125123bp,G+C含量為46.1%;其核苷酸序列如序列表中序列1所示。

2.一種減毒水痘活疫苗,其由權利要求1所述的毒株制備而來。

3.權利要求2所述的疫苗,其為凍干劑型。

4.權利要求2所述的疫苗,其為液體劑型。

5.一種制備減毒水痘活疫苗的方法,包括如下步驟:

a)宿主細胞的培養步驟;在該步驟中,在pH6.8-7.0的含有10%(重量/體積)小牛血清的液體培養基中使宿主細胞擴增傳代;

b)病毒的接種、生長步驟;該步驟如下完成:棄去步驟a)中所用的培養液,用權利要求1所述的毒株感染步驟a)獲得的宿主細胞并使接種了病毒的宿主細胞在pH7.2-7.4的含有2%(重量/體積)牛血清的液體培養基中維持生長的步驟;

c)病毒的增殖步驟;即棄去步驟b)所用的培養液并使步驟b)得到的培養物在含有0.05-0.5%(重量/體積)人白蛋白的液體培養基中培養以使病毒進一步增殖;以及

d)收獲步驟c)培養的病毒的步驟。

6.權利要求5所述的方法,其中步驟b)的感染復數M.O.I.為0.01-1。

7.權利要求5所述的方法,其中

所述的液體培養基為選自MEM、DMEM、199、RPMI1640、Eagle’s、Earle’s中的任一種培養液。

8.權利要求5所述的方法,其中

在步驟b)和步驟c)之間還包括用PBS、生理鹽水、Earle’s液或Eagle’s液對培養細胞進行沖洗的步驟。

9.權利要求5所述的方法,其中所述的步驟d)是如下進行的:在細胞的病變程度達至少75%時,吸出所述液體培養液,加入保護劑后,破碎細胞,去除細胞碎片,獲得疫苗原液。

10.權利要求5-9所述的方法,其中所述的宿主細胞為2BS細胞。

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