本發明涉及制備含MBL的組合物的方法，還涉及免疫系統疾病和障礙的治療，包括免疫防御系統內部缺陷的治療。更具體而言，本發明涉及與感染易感性增加相關的甘露聚糖結合凝集素(MBL)缺陷或其潛伏狀態的治療。本發明進一步涉及編碼人MBL的新表達構建體的制備，一種新的人MBL重組制劑，而且還包括在與免疫抑制性化療等相關的狀態和/或MBL缺陷狀態(包括潛伏狀態，即非即需)等病情的治療方法中使用該化合物。所述的治療針對人，以及免疫系統行為與人免疫系統相似的動物。

發明背景

免疫系統包括一套復雜的識別和靶向病原微生物或其感染細胞的細胞和分子機制。最近，MBL作為先天免疫系統的重要組成部分很受關注，先天免疫系統是指在出生時就起作用的免疫系統，相反，適應性免疫防御只是在嬰兒期獲得其全部的保護身體的能力(Janeway等，1999)。依靠與微生物表面的碳水化合物結合，MBL介導補體系列成分的激活，即一系列的酶激活步驟，最終鎖定目標以便通過吞噬或溶解微生物而破壞目標(Law和Reid，1995)。補體系統通過至少三個不同的途徑激活，分別稱為經典途徑、替代途徑和MB凝集素途徑(Janeway等，1999)。經典途徑以補體因子1(C1)識別表面結合的免疫球蛋白為起始。C1復合物由兩種蛋白分解酶，C1r和C1s，以及具有免疫球蛋白識別結構域的非酶性部分C1q組成。C1q和MBL具有共同的結構特點，用電子顯微鏡觀察時，這兩種分子都具有花環樣外型。與C1q相似，MBL也與兩種蛋白分解酶，即甘露聚糖結合型凝集素相關蛋白酶(MASP)形成復合物。這三種途徑均產生與激活表面即所靶定的微生物病原體表面結合的補體因子3的轉換酶(C3轉換酶)。C3向表面結合型C3b的轉換在通過吞噬或溶解作用消除微生物病原體的過程中是關鍵步驟(Janeway等，1999)。

甘露聚糖結合型凝集素(MBL)，也稱為甘露聚糖結合蛋白或甘露糖結合蛋白(MBP)，首先是在家兔中鑒定的(Kawasaki等，1978)。甘露聚糖結合型凝集素(MBL)屬于一組可溶性Ca²⁺依賴性(C-型)凝集素，它們含有C-末端碳水化合物識別結構域和膠原樣區域，后者以甘氨酸(Gly)及其后兩個非甘氨酸氨基酸組成的重復三聯體基序為特點。因此MBL屬于膠原凝集素(collectin)，即具有膠原樣區域的C-型凝集素，它還包括肺表面活性蛋白A和D以及共凝集素和CL-43，但是這些成分僅在牛群中得到鑒定(Holmskov等，1994)。人MBL蛋白由多達18個相同的32kDa多肽鏈組成(Lu等，1990)，每個多肽鏈包括21個氨基酸的短N末端片段，其中含三個半胱氨酸，其后是7個膠原基序Gly-X-Y重復序列，中間插入一個Gln殘基，隨后又是12個Gly-X-Y重復序列。一段小的34殘基“頸區”將93個氨基酸的C末端Ca²⁺依賴性凝集素結構域與該分子的膠原區域結合(Sastry等，1989)。三個MBL多肽鏈結合成MBL亞單位。MBL由多達6個15nm?MBL亞單位莖組成在底部結合的花環。后來在嚙齒類動物(Miznuno等，1981；Oka等，1988)、牛(Holmskov等，1993a；Kawai等，1997)和雞(Oka等，1985；Lauren等，1995；Laursen等，1998)中鑒定出了MBL。在嚙齒類動物(Drickamer等，1986)和恒河猴(Mogues等，1996)中發現了兩種類型的MBL基因，通常稱為A型和C型。在大鼠中發現了MBL“B”假基因(Drickamer等，1986)，最近又從人基因組中克隆了MBL假基因，序列分析表明這是靈長類MBL-A基因的殘跡(Guo等，1998)。人MBL是Kawasaki等在1983年發現的。目前僅鑒定出一個活性人MBL基因，它包括MBL基因中的四個外顯子和三個間插內含子，長度約為6kb，位于10q11.2-q21(Sastry等，1989；Taylor等，1989)。

所述三條多肽鏈的膠原區域組成一個亞單位，通過二硫鍵使其穩定。通過二硫鍵以及非共價相互作用將各個亞單位結合(Lu等，1990)。

然而，這些二硫鍵的位置還沒有完全確定。在非還原條件下MBL的SDS-PAGE分析中出現了表觀分子量(m.w.)大于200kDa的條帶，可能代表由3、4、5和甚至6個亞單位組裝成的大分子(Lu等，1990)。