[其他]制備新的耐熱的轉葡糖苷酶方法無效
| 申請號: | 86106322 | 申請日: | 1986-09-19 |
| 公開(公告)號: | CN86106322A | 公開(公告)日: | 1987-04-08 |
| 發明(設計)人: | 約翰·江百郡;小奧雷斯蒂·約翰蘭特羅 | 申請(專利權)人: | 邁爾斯實驗室公司 |
| 主分類號: | C12N9/10 | 分類號: | C12N9/10;C12P9/18;//;C12R1645) |
| 代理公司: | 中國專利代理有限公司 | 代理人: | 王巍 |
| 地址: | 美國印第安*** | 國省代碼: | 暫無信息 |
| 權利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 制備 耐熱 葡糖 方法 | ||
本發明是關于從Talaromyces????duponti中制備轉葡糖苷酶的新方法。該轉葡糖苷酶,十分耐熱,能用于把麥牙糖轉化成4-α葡糖基麥牙糖和異麥牙糖。
轉葡糖苷酶(也已知為1,4-α-D-葡聚糖-6-α-D-葡糖(基)轉移酶和轉葡糖基酶)已從各種微生物中獲得。這是一種酶,它能從麥牙糖中由鍵裂和鍵的形成而引起三糖酶4-α-葡糖基麥牙糖和二糖異麥牙糖的形成。這些低聚糖是不發酵的,故能用于食品、軟質飼料和其它工業,也用于新食品配制上。例:參閱Nunokawa等,日本專利號Sho.56(1981)-27236。他們敘述了一種方法,該方法是用Aspergilluo????Sairoi或A.Vsami培養的一種菌株生產轉葡糖苷酶和葡糖淀粉酶。培養物濾液是被經過一個保留轉葡糖苷酶的樹脂貯存柱,同時葡淀粉酶進入流出液。于是轉葡糖苷酶和乙酸緩沖液,pH5.5,便一起從樹脂中被去除。同樣,Pazur等在“一種霉菌的轉葡糖基酶的作用方式和分離中”,摘自生化和營養料,Nebraska、Lincoln、Nebraska等大學,生物化學和生物物理的案卷保管處,93卷,43-49(1961)頁中,敘述了一種方法來獲得Asperqillus????Niger的轉葡糖基酶,包括在二乙氨基乙基纖維素、淀粉和羧甲基纖維素上,用色譜和吸附法,從其它共同生成的糖酶中來分離這種酶。
另一方面,Tamura等在美國專利號4,247,637中,敘述了一種從Talaromyces????duponti菌株中生產耐熱的葡糖淀粉酶方法,包括,在一種營養培養基中,培養菌株和分離酶。當它們培養出菌株和用過濾去除菌類之后,把它們通過有活性粘土的濾液,并能在流出液中找到葡糖淀粉酶。
即使不去識別Tamura等所提的一切,也不去管一種十分耐熱的轉葡糖苷酶,Talaromyces????duponti也會分泌出轉葡糖苷酶。
同樣,現在科學家們已經發現,在一種適當營養介質中,培養Talaromyces????duponti細胞,便能制備出耐熱的轉葡糖苷酶。
本發明提供了一種制備轉葡糖苷酶的方法,包括在一種適當的營養生長介質中,培養Talaromyces????duponti的菌株和分離轉葡糖苷酶。本發明也提供了由T.duponti一種真菌生成的轉葡糖苷酶。
本發明是專門關于從真菌類T.duponti中獲取轉葡糖苷酶的酶。這種酶是,在這種微生物的一種營養生長介質中,由發酵生成。這種酶在發酵過程中被分泌出來之后,生物量可用任何一種液體或固體分離技術來從發酵液體培養基中去除,如:過濾法或傾析離心法來得到一種含酶溶液。
一般來講,凡是能用于培養一般霉菌的介質都可用來作為T.duponti發酵的營養源。各種炭源是眾所皆知的,它們可選自淀粉、糖蜜、糠米等等。氮源也是一般皆知的,諸如:大豆、棉花籽、胨、玉米漿、酵母膏等等。硫酸鹽或氯化物鹽也被用于發酵介質,如:硫酸鎂、氯化鈣、氯化鈉和氯化鉀。磷酸鹽也常被應用因為它們常可用作緩沖劑。另外,發酵的pH值是可以調節的,最好是很接近中性的范圍,用的堿如:氫氧化鈉或氫氧化鉀;用的酸如:鹽酸或醋酸。
pH的條件、時間和溫度,在培養霉菌的工藝上是從所皆知的,pH必須是在約3-9的范圍內,最好在約5-8的范圍內。培養介質的一種很佳的pH是十分接近中性。發酵可在任何地方進行,大致為2天至10天,最好是約4天至8天。溫度必須是在約25℃-50℃之間,最好是在30℃-45℃之間。最合適的生長溫度是介于40℃左右。
凡屬于生成轉葡糖苷酶的Talaromyces????duponti類的真菌都能用于本發明。在一個很佳的實施例中,所用的T.duponti菌株是貯存在發酵研究院,工業科技所,西巴城,日本,在FRI登記,登記號為4566。人們意外地發現,由這種特殊真菌的菌株生成的轉葡糖苷酶是特別嗜熱的,這可從下例見到。FRI4566突變型菌株也能應用。Talaromyces????duponti的鑒定,在“嗜熱的真菌”一書中由Cooney和Emerson進一步闡述;“在Trans.Mycol.Soc.,”日本,第14卷中由Awao和Mitsuqi闡述。另外,在美國專利4,247,637中也詳細地引證了這種菌株和它的繁殖。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息,商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于邁爾斯實驗室公司,未經邁爾斯實驗室公司許可,擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作,請聯系【客服】
本文鏈接:http://www.17sss.com.cn/pat/books/86106322/2.html,轉載請聲明來源鉆瓜專利網。





