本發(fā)明是關于利用遺傳工程技術生產(chǎn)可用作藥物的物質(zhì)的方法，特別是關于較之常規(guī)方法更為有效地生產(chǎn)這些物質(zhì)的方法，尤其是涉及利用病毒DNA于體外和體內(nèi)生產(chǎn)這類物質(zhì)的方法。另一方面，本發(fā)明涉及利用核多角體病毒，于家蠶〔中國桑蠶（Bombyx????mori）〕體內(nèi)有效地生產(chǎn)各種有用物質(zhì)的方法。本發(fā)明也涉及到用于實施上述方法的載體和重組體病毒DNA，以及以其生產(chǎn)同樣物質(zhì)的方法。

以前曾報導過許多借助重組DNA技術的優(yōu)越性，使用載體等在大腸桿菌、枯草桿菌、啤酒酵母等微生物體內(nèi)生產(chǎn)有用物質(zhì)的方法。

有一篇報導述及試圖利用一種其結構基因被替換后的病毒DNA（Autographa????californica核多角體病毒DNA），在培養(yǎng)的細胞（一種建立的Spodoptera????frugiperda細胞系）內(nèi)生產(chǎn)β-干擾素和β-半乳糖苷酶〔Molecular????and????Cellular????Biology，3（12），2156-2165（1983）;ibid.，4（3），399-406（1984）〕。但問題在于用來完成該方法的A.Californica病毒是可在外界生存的有害毒株。因此以所說的方法來生產(chǎn)有用物質(zhì)是不能令人滿足的。本發(fā)明人進行了一些試圖提供一種更好方法的研究，以生產(chǎn)有用物質(zhì)現(xiàn)已完成了本發(fā)明。

本發(fā)明提供一種利用中國家蠶核多角體病毒（以下縮寫為BmNPV）的DNA，以遺傳工程技術生產(chǎn)如蛋白質(zhì)或糖蛋白等有用物質(zhì)的方法，特別是提供一種利用所說的BmNPV????DNA中啟動子區(qū)域的功能優(yōu)點與有用物質(zhì)之基因重組而得到的重組體DNA、以及用于這種重組的重組載體，以有效地生產(chǎn)有用物質(zhì)的方法。本發(fā)明還提供一種利用與BmNPV重組轉(zhuǎn)移載體結合方式影響轉(zhuǎn)染的方法，該重組的轉(zhuǎn)移載體含有一個原來存在于多面體蛋白質(zhì)結構基因之上游，且仍包括所說結構基因之啟動子區(qū)域的5′上游BmNPV????DNA片段、一個翻譯起始密碼子以及一個產(chǎn)生有用物的基因，帶有或不帶有原先存在于所說的多角體蛋白結構基因下游的3′下游BmNPV????DNA片段。本發(fā)明進一步提供一種生產(chǎn)有用物質(zhì)的方法，其包括用重組轉(zhuǎn)移載體和BmNPV????DNA的混合物接種培養(yǎng)的細胞或活的家蠶體以便形成重組體BmNPV，從而在所說的細胞或活體內(nèi)產(chǎn)生所說的重組BmNPV，或者以同樣方法用重組BmNPV接種培養(yǎng)的細胞或活的家蠶-該重組BmNPV是通過由BmNPV????DNA和大腸桿菌質(zhì)粒如PBR322制備一個連接的DNA，再用其它的適當方法進一步用生產(chǎn)有用物質(zhì)的基因取代多面體蛋白結構基因而構建的，并在所說的細胞或活體內(nèi)增殖所說的重組體BmNPV。本發(fā)明的一個特殊方面是，其所提供的制造有用物質(zhì)的方法包括在培養(yǎng)的細胞或宿主（特別是由中國家蠶得到的細胞系或恬的家蠶體）內(nèi)增殖重組的中國家蠶核多角體病毒（BmNPV），該重組體是通過重組含有原先存在于多角體蛋白結構基因上游且仍包括所說的結構基因啟動子區(qū)域、一個翻譯起始密碼子和產(chǎn)生有用物質(zhì)的基因的5′上游BmNPV????DNA片段而產(chǎn)生的，其帶有或沒有原先存在于所說的多角體蛋白結構基因下游的3′下游BmNPV????DNA片段。另一方面，本發(fā)明提供了一種載體，其含有最初存在于所說的多角體蛋白結構基因上游且仍包括所說的結構基因之啟動子的5′上游BmNPV????DNA片段，以及一個最初存在于所說之結構基因下游的3′下游BmNPV????DNA片段，另外，剛剛提到的這種載體中的5′上游DNA片段是跟在翻譯起始密碼子和產(chǎn)生有用物質(zhì)的基因之后的。再一個方面，本發(fā)明提供一種生產(chǎn)有用物質(zhì)的方法，其包括由BmNPV????DNA上切去多角體蛋白結構基因，連同有自所說的結構基因的且包括所說的結構基因的啟動子區(qū)域的5′上游部分，以及自所說的結構基因下游的3′下游部分，用產(chǎn)生有用物質(zhì)的基因去置換所得到的DNA片段的結構基因部分，將置換產(chǎn)物插入載體中，將如此產(chǎn)生的與BmNPV????DNA與BmNPV????DNA聯(lián)合轉(zhuǎn)移到細胞或宿主中，以便轉(zhuǎn)染并增殖所得到的重組BmNPV????DNA;經(jīng)與產(chǎn)生有用物質(zhì)的基因重組而產(chǎn)生的重組BmNPV????DNA為異源基因;剛剛提到的這種重組BmNPV????DNA，其重組是通過在多角體蛋白基因區(qū)域置換，或在某些其它區(qū)域插入而實現(xiàn)的;一種以遺傳工程技術生產(chǎn)有用物質(zhì)的方法包括利用BmNPV????DNA作載體;而且以遺傳工程技術生產(chǎn)有用物質(zhì)的一種方法包括利用原來存在于多角體蛋白結構基因之上游并仍包括所說的結構基因之啟動子區(qū)域的5′上游BmNPV????DNA部分、以及原來存在于所說的結構基因之下游的3′下游BmNPV????DNA部分。