[發(fā)明專利]一種快速篩選CRISPR-Cas9基因組編輯gRNA靶位點的方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202110461387.0 | 申請日： | 2021-04-27 |
| 公開（公告）號： | CN113088559A | 公開（公告）日： | 2021-07-09 |
| 發(fā)明（設計）人： | 畢方鋮;張森;吳少平;胡春華;竇同心;易干軍 | 申請（專利權）人： | 廣東省農(nóng)業(yè)科學院果樹研究所 |
| 主分類號： | C12Q1/66 | 分類號： | C12Q1/66;G01N21/64 |
| 代理公司： | 北京慕達星云知識產(chǎn)權代理事務所(特殊普通合伙) 11465 | 代理人： | 崔自京 |
| 地址： | 廣東省廣州市*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 快速 篩選 crispr cas9 基因組 編輯 grna 靶位點 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種快速篩選CRISPR-Cas9基因組編輯gRNA靶位點的方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)在靶標基因的不同位置設計N個靶點，分別構建基因組編輯載體和LUC融合靶點的表達載體；
(2)測試LUC融合靶點后載體中雙熒光素酶能正常表達；
(3)將N個靶點的基因組編輯載體與LUC融合靶點載體共表達原生質體，利用雙熒光素酶報告系統(tǒng)測定原生質體LUC和REN的活性，比較N個靶點LUC/REN的比值，確定最小比值者為最佳靶點。
2.根據(jù)權利要求1所述的快速篩選CRISPR-Cas9基因組編輯gRNA靶位點的方法，其特征在于，N≥2。
3.上述快速篩選CRISPR-Cas9基因組編輯gRNA靶位點的方法在基因組編輯中的應用。
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