本發(fā)明公開一種可檢測(cè)人體免疫狀態(tài)的試劑盒，所述試劑盒可用于監(jiān)測(cè)人體免疫狀態(tài)的變化，所述試劑盒包含被標(biāo)記的45種抗體，所述45種抗體為單克隆抗體CD127(IL?7Ra)、CD14、CD16、CD19、CD197(CCR7)、CD25(IL?2Ra)、CD3、CD38、CD4、CD45RA、CD56、CD8、HLA?DR、TCRgd、CD11b、CD11c、CD123(IL?3R)、CD161、CD183(CXCR3)、CD185(CXCR5)、CD196(CCR6)、CD20、CD24、CD27、CD278(ICOS)、CD279(PD?1)、CD28、CD33、CD57、CD85j、CD86、CD94、IgD、CD152(CTLA?4)、CD274(PD?L1)、CD39、CD66b、CD68、FoxP3、Granzyme B、Ki?67、T?bet、CD194、CD45RO、CD45。本發(fā)明公開的試劑盒，利用45種抗體，可以在多色流式細(xì)胞儀或者質(zhì)譜流式細(xì)胞儀平臺(tái)通過(guò)靜脈采集外周血即可快速、準(zhǔn)確地對(duì)外周血中免疫細(xì)胞進(jìn)行深度分析，所述試劑盒特異性強(qiáng)，靈敏度高。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及細(xì)胞生物學(xué)、生物醫(yī)學(xué)檢測(cè)領(lǐng)域中的檢測(cè)試劑盒，尤其是一種用于檢測(cè)人體免疫狀態(tài)的檢測(cè)試劑盒，可以用于評(píng)估人體免疫狀態(tài)及疾病風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)。

背景技術(shù)

外周血淋巴細(xì)胞根據(jù)生物學(xué)功能和細(xì)胞表面抗原表達(dá)分為T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞、NK淋巴細(xì)胞。T淋巴細(xì)胞主要參與細(xì)胞免疫，表達(dá)CD3抗原；B細(xì)胞主要參與體液免疫，表達(dá)CD19抗原；NK細(xì)胞表達(dá)CD16和/或CD56，在機(jī)體中不依賴抗原刺激自發(fā)地發(fā)揮細(xì)胞毒效應(yīng)。其中，T細(xì)胞又包括輔助T細(xì)胞(Th)和抑制T細(xì)胞(Ts)，它們分別表達(dá)CD4和CD8，而根據(jù)轉(zhuǎn)錄因子和分泌的細(xì)胞因子的不同，Th細(xì)胞可以分為Th1、Th2、Th17、Th19、Th22、Tfh、Treg等多種類型，根據(jù)T細(xì)胞激活狀態(tài)不同，又能夠分為初始T細(xì)胞、效應(yīng)T細(xì)胞和記憶性T細(xì)胞。

免疫調(diào)節(jié)治療在多種癌癥、自身免疫病及炎癥、過(guò)敏中都取得了臨床療效，廣泛應(yīng)用的治療策略如造血干細(xì)胞移植、免疫檢查點(diǎn)抑制、CART療法等，許多免疫治療試驗(yàn)都伴隨著免疫監(jiān)測(cè)，從免疫亞群和單細(xì)胞水平提供免疫細(xì)胞狀態(tài)的重要提示。監(jiān)測(cè)外周血免疫細(xì)胞是免疫診斷和生物標(biāo)志物篩查的重要工具，有望更好地了解免疫發(fā)病機(jī)制和病理學(xué)，并確定新的治療靶點(diǎn)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種可用于檢測(cè)人體免疫狀態(tài)的試劑盒，同時(shí)，本發(fā)明還提供了所述試劑盒的制備方法以及所述試劑盒在檢測(cè)人體免疫狀態(tài)中的應(yīng)用。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案為：一種試劑盒，所述試劑盒包含被標(biāo)記的45種抗體，所述45種抗體為單克隆抗體CD127(IL-7Ra)、CD14、CD16、CD19、CD197(CCR7)、CD25(IL-2Ra)、CD3、CD38、CD4、CD45RA、CD56、CD8、HLA-DR、TCRgd、CD11b、CD11c、CD123(IL-3R)、CD161、CD183(CXCR3)、CD185(CXCR5)、CD196(CCR6)、CD20、CD24、CD27、CD278(ICOS)、CD279(PD-1)、CD28、CD33、CD57、CD85j、CD86、CD94、IgD、CD152(CTLA-4)、CD274(PD-L1)、CD39、CD66b、CD68、FoxP3、Granzyme B、Ki-67、T-bet、CD194、CD45RO、CD45。

本發(fā)明所述試劑盒對(duì)外周血中的T和B淋巴細(xì)胞和NK細(xì)胞、單核細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞及亞群深入檢測(cè)，并包含一系列細(xì)胞激活標(biāo)記及免疫檢查點(diǎn)蛋白。應(yīng)用于在臨床研究期間監(jiān)測(cè)及全面深度分析患者的外周免疫系統(tǒng)狀態(tài)，不僅有助于闡明新療法的免疫細(xì)胞機(jī)制，它還通過(guò)識(shí)別激活狀態(tài)、免疫檢查點(diǎn)特征預(yù)測(cè)患者的疾病進(jìn)展風(fēng)險(xiǎn)，幫助預(yù)測(cè)對(duì)治療的臨床反應(yīng)。

作為本發(fā)明所述試劑盒的優(yōu)選實(shí)施方式，所述45種抗體分別被熒光素標(biāo)記或者金屬元素標(biāo)記。本發(fā)明所述試劑盒中的抗體標(biāo)記，優(yōu)選采用熒光素標(biāo)記或金屬元素標(biāo)記，但不限于熒光素標(biāo)記和金屬元素標(biāo)記。所述45種抗體分別為不同的熒光素或45種不同的金屬元素標(biāo)記。