一株小腸結腸炎耶爾森氏菌單克隆抗體雜交瘤細胞株及其應用，屬于食品安全免疫檢測領域。本發明小腸結腸炎耶爾森氏菌單克隆抗體雜交瘤細胞株JSL3H3，分類命名為單克隆細胞株，保藏日期2020年9月27日，保藏編號CGMCC No.20786。此細胞株分泌的單克隆抗體，對小腸結腸炎耶爾森氏菌具有較好的特異性和檢測靈敏度。本發明合成了小腸結腸炎耶爾森氏菌完全抗原，并將它與等量弗氏佐劑混合乳化完全，通過背部皮下注射免疫BALB/c小鼠，經過間接競爭酶聯免疫法的篩選和三次亞克隆，得到雜交瘤細胞株JSL 3H3。此細胞株分泌的單克隆抗體，對小腸結腸炎耶爾森氏菌具有較好的特異性，本發明成果可用于食品中小腸結腸炎耶爾森氏菌的特異性檢測，具有實際應用價值。

技術領域

本發明涉及一株小腸結腸炎耶爾森氏菌單克隆抗體雜交瘤細胞株及其應用，屬于食品安全免疫檢測領域。

背景技術

耶爾森氏菌屬屬于腸桿菌科，由三種人類致病菌組成：鼠疫耶爾森氏菌(鼠疫病原體)，假結核耶爾森氏菌和負責人腸道耶爾森氏菌病的小腸結腸炎耶爾森氏菌。腸型耶爾森菌病是由于食用受污染的食物或水引起的食源性疾病，可通過糞-口途徑在人群之間傳播。腸型耶爾森菌病通常以在腸道中開始的自限性急性感染為特征，并且通常限于回盲腸交界處。腹瀉是小腸結腸炎耶爾森氏菌感染的主要癥狀。此外，小腸結腸炎耶爾森氏菌還可以引起不同的臨床癥狀，例如皮疹，結膜炎，急性器官衰竭和中毒性休克綜合癥，也可能發生更嚴重的感染和敗血癥，尤其是在新生兒，老年人和免疫功能低下的患者中。小腸結腸炎耶爾森氏菌在世界范圍內廣泛分布，在寒冷和溫帶地區發病率更高。大多數與人類耶爾森氏菌病相關的小腸結腸炎耶爾森氏菌菌株均屬于2/O：9、4/O：3、2/O：5,27、3/O：3和1B/O：8血清型。據統計，小腸結腸炎耶爾森氏菌是法國和歐洲僅次于彎曲桿菌和沙門氏菌的第三大細菌性腹瀉病原體。

目前，通過從糞便培養物中直接分離腸致病性耶爾森氏菌，并在特定的肉湯中富集，然后再在頭孢磺啶-氯苯酚-新生霉素的半選擇性培養基上進行分離，生化鑒定，即可檢出小腸結腸炎耶爾森氏菌。然而，在選擇性培養基上進行分離，需要耗時的富集步驟。一些分子技術應用于小腸結腸炎耶爾森氏菌分析檢測，例如DNA菌落雜交，PCR，實時PCR，多基因座序列分型和脈沖場凝膠電泳等。但是，其中大部分技術都需要分離細菌或富集步驟，還需要特定的設備，及專業的操作人員。免疫分析由于操作簡單、快速、實時檢測、反應靈敏、價格便宜等優點廣泛地應用于食源性致病菌分析檢測，為食源性致病菌提供另一種檢測途徑。

發明內容

本發明的目的是提供一株小腸結腸炎耶爾森氏菌單克隆抗體雜交瘤細胞株及其應用。

本發明的第一個目的是提供一株小腸結腸炎耶爾森氏菌單克隆抗體雜交瘤細胞株JSL 3H3，已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心CGMCC，地址北京市朝陽區北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所，分類命名為單克隆細胞株，保藏日期2020年9月27日，保藏編號CGMCC No.20786。

本發明的第二個目的是提供小腸結腸炎耶爾森氏菌單克隆抗體，由保藏編號為CGMCC No.20786的單克隆細胞株JSL 3H3分泌產生。

本發明的第三個目的是提供小腸結腸炎耶爾森氏菌單克隆抗體的應用。

本發明的一種實施方式中，所述應用是食品中小腸結腸炎耶爾森氏菌的分析檢測。

本發明的一種實施方式中，一種試劑盒，含有所述的單克隆細胞株JSL3H3。所述試劑盒在檢測小腸結腸炎耶爾森氏菌的中的應用。

本發明的第四個目的是提供小腸結腸炎耶爾森氏菌完全抗原的制備方法。

本發明的小腸結腸炎耶爾森氏菌單克隆抗體雜交瘤細胞株的篩選方法，主要包括以下步驟：