本發明公開了一種利用灰飛虱傳毒接種鑒定玉米粗縮病抗性的方法，屬于植物抗病性鑒定技術領域。通過灰飛虱的飼養、玉米粗縮病毒源的培育以及灰飛虱飼毒、灰飛虱接種和玉米粗縮病抗性評價步驟，可高效、可靠、穩定的鑒定玉米粗縮病抗性，為玉米品種資源的發掘鑒定、品種抗性評價、抗病品種選育和抗性遺傳打下基礎。

技術領域

本發明屬于植物抗病性鑒定技術領域，具體涉及一種利用灰飛虱鑒定玉米粗縮病抗性的方法。

背景技術

玉米粗縮病是嚴重危害玉米的一種暴發流行性病毒病害，玉米發病后不僅株高顯著降低，而且雄穗發育不良，散粉少，雌穗稍短而粒少，重者雄穗不能抽出或無花粉，雌穗畸形不結實或結實極少，造成嚴重減產。玉米粗縮病最早在意大利北部發現，遍及歐洲和亞洲，1954年我國首次在新疆南部和甘肅西部發現，20世紀60年代初在河北、浙江首次發生,70年代和90年代再次在我國大范圍長時間的流行，至今已擴展到河北、陜西、山東、江蘇、湖北、遼寧等10余省市。據統計，1996年全國發病面積233萬hm²，絕收4萬hm²，一般病田病株率40％，平均減產10％-30％。2008年山東省發生面積達73.3萬hm²，絕產1.67萬hm²,造成了巨大的經濟損失。粗縮病已經成為我國玉米上主要病害之一，對玉米生產構成了嚴重威脅。目前，調整玉米播種期是玉米粗縮病的主要防治措施(CN201310013459)，在病害防治中發揮了重要作用。但是，播期調整在地區間、品種間有其局限性，尤其是鮮食玉米上由于市場需求限制了播期調整的空間，因此，培育和應用抗病品種是防治玉米粗縮病最經濟有效的措施，但是目前缺乏準確可靠的抗性鑒定方法，影響了抗粗縮病玉米品種的選育。

水稻黑條矮縮病毒(Rice black streaked dwarfvirus，RBSDV)是玉米粗縮病的主要病原，不能通過種子、土壤和、嫁接、汁液摩擦等傳播，只能攜帶病毒的灰飛虱以持久方式傳播。這種傳毒方式的局限性致使玉米品種的抗病性鑒定和篩選的難度較大，需要利用灰飛虱傳毒接種玉米發病，主要有田間自然鑒定法和室內人工接種鑒定法兩種。目前仍主要采用田間自然發病鑒定的方法，田間自然鑒定法是5月中下旬播種玉米，使玉米苗期與灰飛虱遷飛高峰期相遇，將病毒傳播侵染玉米，粗縮病的發生與灰飛虱的蟲量及帶毒率密切相關，因其受到自然條件的制約，無法有效控制諸如灰飛虱帶毒率、接蟲量、接種時間等，不同年份、不同地點的鑒定結果差異較大，因而準確性和可靠性較差。如王桂躍等人通過自然鑒定結果認為丹340表現出較強的粗縮病抗病性，而路銀貴等人的自然鑒定研究結果認為丹340屬于高感自交系。人工接種鑒定法是捕獲田間灰飛虱或人工飼養灰飛虱飼毒后接種玉米，而后在抽雄孕穗期癥狀觀察和調查，計算病情指數，評價玉米品種抗性。室內人工接種鑒定法克服田間自然發病的局限性，提高鑒定結果可信度。不論田間自然鑒定法還是室內人工接種鑒定法，二者均以病情指數為評價指標，需要調查較大的群體數量和多次重復鑒定，不但增加了工作量，而且加長了育種時間。

隨著基因定位和克隆技術的發展，利用分子標記輔助篩選、發掘和創新抗病種質為加快和高效培育抗病品種提供了全新和有利工具。但迄今玉米粗縮病抗性QTL檢測還處于研究起步階段，在生產上也沒有發現對玉米粗縮病免疫的品種，所以對玉米粗縮病抗性種質進行大規模篩選仍以生物學接種鑒定為主。

但現有技術存在以下缺點：1.采用玉米揚花期調查粗縮病發病情況，鑒定周期長，需要鑒定群體較大，而且占用場地大；2.RBSDV在玉米品種體內的增殖與玉米抗性相關，檢測病毒積累量可以在玉米苗期從分子水平上確定其抗感性，但病毒檢測成本較高；3.玉米抗粗縮病抗性為數量遺傳性狀，由多個基因控制，利用分子標記篩選抗性種質材料需要檢測多個基因位點，僅利用一個分子標記不能完全反映玉米種質抗性。

因此，如何提供一種高效、可靠、穩定的玉米粗縮病抗性鑒定方法是本領域亟待解決的問題。

發明內容

本發明公開了一種利用灰飛虱傳毒接種鑒定玉米粗縮病抗性的方法。

為了實現上述目的，本發明采用如下技術方案：