[發明專利]一種細胞表面人工自組裝膜在審
| 申請號: | 202110013679.8 | 申請日: | 2021-01-06 |
| 公開(公告)號: | CN112695026A | 公開(公告)日: | 2021-04-23 |
| 發明(設計)人: | 劉袖洞;于煒婷 | 申請(專利權)人: | 大連大學 |
| 主分類號: | C12N11/096 | 分類號: | C12N11/096;C12N11/10;C12N11/04;C12P7/22;C12R1/865 |
| 代理公司: | 大連智高專利事務所(特殊普通合伙) 21235 | 代理人: | 李猛 |
| 地址: | 116622 遼寧省*** | 國省代碼: | 遼寧;21 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 細胞 表面 人工 組裝 | ||
1.一種細胞表面人工自組裝膜,其特征在于,細胞表面人工自組裝膜是含有納米粒的兩親復合水凝膠膜,將帶電荷的兩親納米粒與帶有相反電荷的聚電解質通過靜電相互作用,層層自組裝到細胞表面形成含有納米粒結構的兩親聚電解質復合水凝膠膜;膜成分包括如下組合:組合1:含有兩親殼聚糖納米粒和聚陰離子,聚陰離子為海藻酸鹽分子或海藻酸鹽衍生物中的一種或一種以上;其中,殼聚糖納米粒與聚陰離子的質量比為1:5-5:1,膜厚度在1-50微米;組合2:含有兩親海藻酸鈉納米粒和聚陽離子,聚陽離子為聚賴氨酸分子、殼聚糖分子或殼聚糖衍生物中的一種或一種以上;其中,兩親海藻酸鈉納米粒與聚陽離子的質量比為1:5-5:1,膜厚度在1-50微米。
2.按照權利要求1所述細胞表面人工自組裝膜,其特征在于,所述組合1成分中的兩親殼聚糖納米粒和組合2成分中的兩親海藻酸鈉納米粒的粒徑均在50-500nm。
3.按照權利要求1所述細胞表面人工自組裝膜,其特征在于,所述組合1成分中的海藻酸鹽包括海藻酸鈉或海藻酸鉀,分子量在20-400kDa。
4.按照權利要求1所述細胞表面人工自組裝膜,其特征在于,所述組合1成分中的海藻酸鹽衍生物為海藻酸鹽羧基或羥基修飾的衍生物,分子量在20-500kDa,且衍生物能夠溶于pH6-7.5的水溶液。
5.按照權利要求1所述細胞表面人工自組裝膜,其特征在于,所述組合2成分中的聚賴氨酸是指α-聚賴氨酸或ε-聚賴氨酸,分子量在10-100kDa。
6.按照權利要求1所述細胞表面人工自組裝膜,其特征在于,所述組合2成分中的殼聚糖,分子量5-200kDa,脫乙酰度50-100%。
7.按照權利要求1所述細胞表面人工自組裝膜,其特征在于,所述組合2成分中的殼聚糖衍生物分子量10-300kDa,且衍生物能夠溶于pH 5-7.5的水溶液,并帶正電荷。
8.按照權利要求1所述細胞表面人工自組裝膜,其特征在于,所述細胞為生物催化常用的微生物細胞,包括真核微生物細胞和原核微生物細胞。
9.按照權利要求1所述細胞表面人工自組裝膜,其特征在于,所述細胞表面人工自組裝膜用于非水相細胞催化體系。
10.權利要求1所述細胞表面人工自組裝膜的制備方法,其特征在于,所述含有納米粒的復合水凝膠膜為組合1成分時,其制備步驟如下:
(1.1)將兩親殼聚糖衍生物通過親疏水作用自組裝形成兩親殼聚糖納米粒;
(1.2)將非水相細胞催化體系中的反應底物與兩親殼聚糖衍生物通過自組裝形成兩親殼聚糖納米粒;
(1.3)離心收集微生物細胞,將細胞重懸,均勻分散在步驟(1.1)或(1.2)制備的兩親殼聚糖納米粒溶液中,反應1-20分鐘,離心清洗反應后的微生物細胞;
(1.4)將步驟(1.3)反應清洗后的微生物細胞重懸,均勻分散在聚陰離子溶液中,反應1-20分鐘,離心清洗反應后的微生物細胞;
(1.5)交替重復步驟(1.3)和步驟(1.4)的過程0-5次,即在微生物細胞表面得到含有納米粒的聚電解質復合水凝膠膜;
所述兩親聚電解質復合水凝膠膜為組合2成分時,其制備步驟如下:
(2.1)將兩親海藻酸鈉衍生物通過親疏水作用自組裝形成兩親海藻酸鈉納米粒;
(2.2)將非水相細胞催化體系中的反應底物與兩親海藻酸鈉衍生物通過自組裝形成兩親海藻酸鈉納米粒;
(2.3)離心收集微生物細胞,將細胞重懸,均勻分散在聚陽離子溶液中,反應1-20分鐘,離心清洗反應后的微生物細胞;
(2.4)將步驟(2.3)反應清洗后的微生物細胞重懸,均勻分散在步驟(2.1)或(2.2)制備的兩親海藻酸鈉納米粒溶液中,反應1-20分鐘,離心清洗反應后的微生物細胞;
(2.5)交替重復步驟(2.3)和步驟(2.4)的過程0-5次,即在微生物細胞表面得到含有納米粒的聚電解質復合水凝膠膜。
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