[發明專利]虹鱒spindlin基因及其應用在審
| 申請號: | 202011430483.0 | 申請日: | 2020-12-07 |
| 公開(公告)號: | CN112553211A | 公開(公告)日: | 2021-03-26 |
| 發明(設計)人: | 劉恩慧;黃天晴;谷偉;徐革鋒;王炳謙;史秀蘭 | 申請(專利權)人: | 中國水產科學研究院黑龍江水產研究所 |
| 主分類號: | C12N15/12 | 分類號: | C12N15/12;C07K14/46;C12Q1/6888 |
| 代理公司: | 哈爾濱市文洋專利代理事務所(普通合伙) 23210 | 代理人: | 何強 |
| 地址: | 150070 黑龍*** | 國省代碼: | 黑龍江;23 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 虹鱒 spindlin 基因 及其 應用 | ||
虹鱒spindlin基因及其應用,涉及一種虹鱒的基因及其應用。本發明提供了一種鑒定虹鱒二、三倍體的有效手段。虹鱒spindlin基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。應用:用于鑒別虹鱒的染色體倍性;具體方法為檢測雌性虹鱒卵巢中spindlin基因的表達量,spindlin基因表達量高的為二倍體雌性虹鱒,spindlin基因表達量低的為三倍體雌性虹鱒。本發明對虹鱒spindlin全長進行了克隆,選取240?330dpf發育時期進行檢測,利用spindlin基因在不同染色體組中表達的差異,作為鑒定不同倍性虹鱒的一種分子手段;從而可以在早期分辨雌性虹鱒是否為三倍體,為提高養殖經濟效益提供可靠、準確的依據。
技術領域
本發明涉及一種虹鱒的基因及其應用。
背景技術
虹鱒(Oncorhynchus mykiss)是我國主要的冷水性養殖魚類之一,因其性成熟后個體伴有死亡率提高、生長率降低、肉質和外觀較差等問題,在生產中廣泛應用不育的三倍體虹鱒替代二倍體從而避免不必要的經濟損失。然而,關于三倍體雌性虹鱒性腺敗育的分子調控機制仍不明確,且缺乏一種鑒定虹鱒二、三倍體的有效手段。
發明內容
本發明提供了一種鑒定虹鱒二、三倍體的有效手段。
本發明虹鱒spindlin基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
上述虹鱒spindlin基因的開放性讀碼框序列如SEQ ID NO.2所示。
本發明虹鱒spindlin基因編碼的spindlin蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。
本發明虹鱒spindlin基因的應用,用于鑒別虹鱒的染色體倍性;具體方法為檢測雌性虹鱒卵巢中spindlin基因的表達量,spindlin基因表達量高的為二倍體雌性虹鱒,spindlin基因表達量低的為三倍體雌性虹鱒。
進一步,在雌性虹鱒240-330dpf發育階段進行spindlin基因表達量檢測。
進一步,在雌性虹鱒240dpf進行spindlin基因表達量檢測。
Spindlin基因是減數分裂紡錘體相關的母體效應因子,從卵母細胞到早期胚胎發育的過渡期間,起到調節細胞周期的作用。本發明對虹鱒spindlin全長進行了克隆,選取240-330dpf發育時期進行檢測,利用spindlin基因在不同染色體組中表達的差異,作為鑒定不同倍性虹鱒的一種分子手段;從而可以在早期分辨雌性虹鱒是否為三倍體,為提高養殖經濟效益提供可靠、準確的依據。
附圖說明
圖1是本發明虹鱒spindlin蛋白的氨基酸序列系統進化樹;
圖2是spindlin基因在虹鱒各組織表達情況圖;
圖3是spindlin基因在二倍體與三倍體虹鱒卵巢組織中不同發育時期表達情況圖。
具體實施方式
本發明技術方案不局限于以下所列舉具體實施方式,還包括各具體實施方式間的任意組合。
實施例1
本實施例虹鱒spindlin基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
制備上述的虹鱒spindlin基因方法:
一、提取虹鱒肝臟組織總RNA,反轉錄得到cDNA;
二、從NCBI數據庫下載比對的相似基因(GenBank:GFIN01057112.1)的mRNA序列,設計引物,以虹鱒cDNA為模板,進行PCR擴增,膠回收,PCR產物連接到pMD-18T,轉化大腸桿菌后測序,得到Omspindlin基因的中間片段;
三、獲取Omspindlin基因3’端序列;
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