[發明專利]高純度低聚半乳糖的制備方法有效
| 申請號: | 202011427659.7 | 申請日: | 2020-12-07 |
| 公開(公告)號: | CN112481328B | 公開(公告)日: | 2023-04-14 |
| 發明(設計)人: | 王敏奇;王庚;汪海東 | 申請(專利權)人: | 浙江大學 |
| 主分類號: | C12P19/00 | 分類號: | C12P19/00;C12P19/04;C12P19/12;C07H3/06;C07H1/06 |
| 代理公司: | 杭州中成專利事務所有限公司 33212 | 代理人: | 金祺 |
| 地址: | 310058 浙江*** | 國省代碼: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 純度 半乳糖 制備 方法 | ||
1.高純度低聚半乳糖的制備方法,其特征在于包括以下步驟:
1)、利用pH=5的乙酸-乙酸鈉緩沖液配制乳糖溶液,利用pH=5的乙酸-乙酸鈉緩沖液配制β-半乳糖苷酶的酶液;
向乳糖溶液中加入酶液,于50±2℃反應4±0.5小時,得低聚半乳糖混合液;
β-半乳糖苷酶與乳糖的用量比為40±5U/g乳糖;
2)、采用硅膠層析:
將低聚半乳糖混合液過硅膠層析柱,洗脫劑為正丁醇:乙醇:乙酸:水=3:1:1:1的體積比混合而得;流速為0.4±0.05ml/min;
收集含目標產物的洗脫液;
所述目標產物為低聚半乳三糖、低聚半乳四糖以及≥低聚半乳五糖;
硅膠為200-300目的硅膠;
3)、將步驟2)所得的洗脫液干燥,得高純度低聚半乳糖。
2.根據權利要求1所述的高純度低聚半乳糖的制備方法,其特征在于:
所述步驟3)的干燥為:先于60±5℃干燥,再用雙蒸水重溶,最后凍干。
3.根據權利要求2所述的高純度低聚半乳糖的制備方法,其特征在于:
所述步驟2)中,通過薄層析法監測所收集的洗脫液中的低聚半乳糖,將只含有低聚半乳糖的洗脫液進行混合。
4.根據權利要求1~3任一所述的高純度低聚半乳糖的制備方法,其特征在于:
所述步驟2)中采用濕法填裝柱。
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