[發明專利]一種含枯草芽孢桿菌的微生物菌劑及其制備方法在審
| 申請號： | 202011408243.0 | 申請日： | 2020-12-05 |
| 公開（公告）號： | CN112522141A | 公開（公告）日： | 2021-03-19 |
| 發明（設計）人： | 邢全軍 | 申請（專利權）人： | 安丘市天賜生物肥料有限公司 |
| 主分類號： | C12N1/20 | 分類號： | C12N1/20;C09K17/14;A01N63/22;A01P21/00;C12R1/125 |
| 代理公司： | 山東華君知識產權代理有限公司 37300 | 代理人： | 呂翠蓮 |
| 地址： | 262100 山東省濰坊市*** | 國省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 枯草 芽孢 桿菌 微生物 及其 制備 方法 | ||
1.一種含枯草芽孢桿菌的微生物菌劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：制備枯草芽孢桿菌菌液、制備枯草芽孢桿菌菌落、制備枯草芽孢桿菌發酵培養液和制備枯草芽孢桿菌菌劑；
所述制備枯草芽孢桿菌菌液，將40-45克磷酸鈉溶解于1000-1100毫升蒸餾水中，然后在20-25℃下用1mol/L的氫氧化鈉溶液將PH調節至7.5-8.0后加入5-8克氯化鎂，使用紫外線殺菌15-20分鐘；然后加入5-6克牛肉膏、10-12克蛋白胨和10-12克氯化鈉，攪拌得到液體培養基，所述攪拌速度為200-210rpm，攪拌時間為30-40分鐘；取0.5-0.7毫升枯草芽孢桿菌菌液加入15-18毫升液體培養基中，于32-35℃下振蕩培養2-3天得到枯草芽孢桿菌菌液。
2.根據權利要求1所述的含枯草芽孢桿菌的微生物菌劑的制備方法，其特征在于，所述制備枯草芽孢桿菌菌落，將3-4克青霉素加入到枯草芽孢桿菌菌液中，于35-38℃下繼續培養，得到枯草芽孢桿菌菌落。
3.根據權利要求1所述的含枯草芽孢桿菌的微生物菌劑的制備方法，其特征在于，所述制備枯草芽孢桿菌發酵培養液，稱取3-4克尿素、2-3克磷酸鉀、1-2克氯化鈣及3-4克木薯淀粉并混合均勻，然后在30-35℃下加入到20-25毫升蒸餾水中得到混合肥料，將0.3-0.5毫升臘樣芽孢桿菌于25-30℃下溶解于混合肥料中；然后將混合肥料與上一步得到的枯草芽孢桿菌菌落混合，于32-35℃下振蕩培養1-2天得到混合菌落；然后將混合菌落的菌株以8-10％(v/v) 的接種量接入裝有40-60mL搖瓶發酵培養基的三角瓶中發酵培養20-25h，即得枯草芽孢桿菌發酵培養液。
4.根據權利要求3所述的含枯草芽孢桿菌的微生物菌劑的制備方法，其特征在于，所述發酵培養基，重量份組成為：70-80份去離子水、10-14份氯化鈉、3-5份麥芽糖、2-4份硝酸鈉、20-25份玉米淀粉、10-13份殼聚糖和3-5份淀粉酶。
5.根據權利要求3所述的含枯草芽孢桿菌的微生物菌劑的制備方法，其特征在于，所述發酵培養基的制備方法為：將去離子水加熱到35-38℃后開始攪拌，控制攪拌速度為60-70rpm，然后按順序加入氯化鈉、硝酸鈉、淀粉酶、玉米淀粉、殼聚糖和麥芽糖，攪拌均勻。
6.根據權利要求1所述的含枯草芽孢桿菌的微生物菌劑的制備方法，其特征在于，所述制備枯草芽孢桿菌菌劑，將枯草芽孢桿菌發酵培養液在發酵培養基中培養結束后，取發酵液2000-3000轉/分鐘離心10-15分鐘，取沉淀,按離心后的沉淀：磷酸二氫鉀：胞外多糖的質量比為（10-12）：1：（3-4）混合均勻，40-44℃烘干45-55min，研碎后過80目不銹鋼篩，即得枯草芽孢桿菌劑菌劑。
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