本發明提供了一種以布魯頓酪氨酸激酶(Bruton tyrosine kinase,BTK)為靶點的小分子抑制劑及其應用，屬于制藥技術領域。本發明以BTK為靶點，利用基于對接的虛擬篩選和體外生物活性評價相結合進行小分子抑制劑的篩選。體外BTK激酶活性測試結果表明，篩選的化合物中有兩個具有較好的BTK抑制活性。所發現的小分子可以為治療BTK有關的疾病，例如類風濕性關節炎、系統性紅斑狼瘡、銀屑病、慢性淋巴細胞白血病和淋巴瘤的新藥研發提供基礎。本發明的先導化合物可進行進一步的結構優化，具有較好的應用前景。

技術領域

本發明屬醫藥化學技術領域，具體涉及以布魯頓酪氨酸激酶(Bruton tyrosinekinase,BTK)蛋白為靶點抑制人BTK激酶活性的先導化合物及其藥用鹽在制備BTK相關的病癥藥物中的應用。

背景技術

BTK最初被鑒定為人類X連鎖無球蛋白血癥(XLA)中的缺陷蛋白，是細胞質酪氨酸激酶的Src相關的Tec家族的成員并在B細胞的發育和激活中起著至關重要的作用。BTK主要在造血細胞例如B細胞，肥大細胞和巨噬細胞中表達，但在T細胞，自然殺傷細胞和血漿中并不常見。

BTK抑制劑因其在癌癥和自身免疫疾病如B細胞惡性腫瘤中的治療潛力而備受關注。2013年，依魯替尼(ibrutinib)被FDA批準為BTK的首創新抑制劑用于治療套細胞淋巴瘤(MCL)和慢性淋巴細胞白血病(CLL),現在處于單一或聯合治療其他適應癥的臨床評估中。

目前的BTK小分子抑制劑分為不可逆和可逆的。不可逆抑制劑通過邁克爾加成與BTK中ATP結合位點中的C481共價結合，從而產生很好地抑制作用。需要注意的是，大多數處于臨床階段的BTK抑制劑是不可逆的。不可逆抑制劑具有強大的功效，但是，近幾年，由于廣泛使用ibrutinib，與ibrutinib結合的C481被其他的氨基酸所替換，這將改變ibrutinib與btk的不可逆共價結合，降低ibrutinib對BTK的親和力，最終導致耐藥性。因此，一個潛在的策略是開發不與C481相互作用的非共價抑制劑，以克服ibrutinib抗BTK C481耐藥突變。如最近的非共價抑制劑BMS-986142(Fenebrutinib)表現出令人鼓舞的療效，目前處于Ⅱ期臨床研究，可能會為可逆BTK抑制劑帶來突破。因此，發現有效且安全的可逆抑制劑以及獲得臨床療效仍是主要挑戰。

隨著計算機技術在藥物研發領域的應用，計算機虛擬篩選為藥物先導化合物的發現提供了一種快速、高效的篩選技術。該技術針對重要疾病特定靶標生物大分子三維結構，從現有小分子數據庫中，搜尋與靶標結合較好的化合物，大大降低實驗篩選化合物數量，縮短了研發周期。

發明內容

本發明的目的在于提供靶向人BTK蛋白的先導化合物及其藥用鹽在制備BTK激酶抑制劑中的應用。其中所述的BTK介導的疾病選自一下疾病中的至少一種：類風濕性關節炎、系統性紅斑狼瘡、銀屑病、慢性淋巴細胞白血病和淋巴瘤。

本發明在對靶標BTK蛋白的抑制劑結合口袋的研究基礎上，篩選得到具有新結構實體的靶向BTK蛋白的小分子抑制劑化合物Ⅰ和化合物Ⅱ，所述的靶向BTK蛋白的小分子抑制劑為針對BTK與ATP結合位點的小分子結構的化合物。

本發明通過基于對接的虛擬篩選，通過Lipinski’s五規則篩選、打分函數評分、結合自由能計算、對人BTK蛋白激酶活性的抑制試驗等多因素綜合分析，最終得到了對BTK有抑制活性的化合物Ⅰ和化合物Ⅱ。

本發明的化合物Ⅰ和化合物Ⅱ經實驗證實，在體外有顯著的抑制人BTK激酶活性效果。本發明的化合物可進一步的結構優化，制備治療BTK蛋白相關疾病(包括類風濕性關節炎、系統性紅斑狼瘡、銀屑病、慢性淋巴細胞白血病和淋巴瘤)的制劑或藥物。

本發明通過三輪篩選出2個具有BTK抑制活性的化合物；所述化合物具有如下特征：

化合物Ⅰ

英文名稱：