TfR1肺組織特異性敲除小鼠模型及其構建方法和應用，屬于小鼠模型構建領域，包括：將TfR1^?/?和Sftpc?CreERT2小鼠雜交；將F1代TfR1^+/?；Sftpc?CreERT2轉基因小鼠和F1代TfR1^+/?轉基因小鼠雜交，得到F2代，基因型分別為TfR1^+/?；Sftpc?CreERT2、TfR1^+/+；Sftpc?CreERT2和TfR1^+/+；將F2代TfR1^+/?；Sftpc?CreERT2轉基因小鼠雜交，得到F3代TfR1^?/?；Sftpc?CreERT2純合子基因敲除小鼠。本發明為深入研究TfR1在肺組織疾病和肺癌發病過程中的作用提供了堅實的研究基礎。

技術領域

本發明屬于小鼠模型構建技術領域，具體涉及TfR1肺組織特異性敲除小鼠模型及其構建方法和應用。

背景技術

轉鐵蛋白受體1(Transferrinreceptor 1，TfR1)，也被稱為CD71，是一些細胞吸收鐵所必需的膜蛋白，但并不是所有的細胞類型吸收鐵都需要的膜蛋白。轉鐵蛋白(Tf)是TfR1的配體，能攜帶細胞外的鐵。Fe²⁺-Tf/TfR1通過受體介導的內吞作用內化并轉運至核內體，在核內體低pH環境中，鐵從Tf釋放出來，并通過跨膜蛋白離開核內體。這種轉運是由二價金屬轉運體(DMT1/SLC11A2)介導的。攝入的鐵可以被血紅素或鐵硫簇直接利用，也可被儲存在鐵蛋白中。轉鐵蛋白受體1(Transferrin receptor 1，TfR1)與肺癌細胞內鐵含量的調節有關。有研究發現，肺癌細胞與正常細胞相比，TfR1表達水平顯著升高。在人類結節病、過敏性肺炎、間質性肺病中均檢測到了TfR1的表達水平異常。在小鼠的肺纖維化模型中，也證實了肺組織中存在TfR1的高表達。然而，TfR1在肺部疾病，尤其是肺癌發病過程中的調控機制還不完全清楚。目前關于肺組織中TfR1的功能研究主要集中在細胞實驗方面，這可能與缺少穩定的動物模型有關。因此，迫切需要構建出一種穩定的動物模型，以便更好的研究TfR1在肺組織中以及肺癌發病過程中的作用和機制。

發明內容

本發明的目的是提供一種TfR1肺組織特異性敲除小鼠模型及其構建方法和應用，以便深入研究TfR1在肺組織中以及肺癌發病過程中的作用和機制。

本發明為解決技術問題所采用的技術方案如下：

本發明的TfR1肺組織特異性敲除小鼠模型的構建方法，包括以下步驟：

步驟一、將TfR1^-/-轉基因小鼠和Sftpc-CreERT2轉基因小鼠進行雜交，得到F1代，經鑒定，基因型分別為TfR1^+/-；Sftpc-CreERT2和TfR1^+/-；

步驟二、將F1代TfR1^+/-；Sftpc-CreERT2轉基因小鼠和F1代TfR1^+/-轉基因小鼠進行雜交，得到F2代，經鑒定，基因型分別為TfR1^+/-；Sftpc-CreERT2、TfR1^+/+；Sftpc-CreERT2和TfR1^+/+；

步驟三、將F2代TfR1^+/-；Sftpc-CreERT2轉基因小鼠進行雜交，經鑒定，得到F3代TfR1^-/-；Sftpc-CreERT2純合子基因敲除小鼠，即TfR1肺組織特異性敲除小鼠模型。

作為優選的實施方式，步驟一中，F1代小鼠基因型鑒定過程如下：

(1)PCR

TfR1^-/-轉基因小鼠基因型鑒定引物序列如下：

TfR1^-/-F：TTCAGTTCCCAGTGACCACA；