[發(fā)明專利]一種HLA-G全長蛋白及其表達(dá)載體、表達(dá)工程菌和制備方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202011129616.0 | 申請日： | 2020-10-21 |
| 公開（公告）號： | CN112239766B | 公開（公告）日： | 2023-01-24 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 袁文文;易汪雪;于倩;王營;柯紅;殷婷子 | 申請（專利權(quán)）人： | 武漢華美生物工程有限公司 |
| 主分類號： | C12N15/70 | 分類號： | C12N15/70;C12N15/66;C12N15/12;C12N1/21;C07K14/74;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京眾達(dá)德權(quán)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11570 | 代理人： | 江慧 |
| 地址： | 430206 湖北省武漢市東湖*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 hla 全長 蛋白 及其 表達(dá) 載體 工程 制備 方法 | ||
1.一種HLA-G全長蛋白的體外制備方法，其特征在于，所述方法包括：
獲得HLA-G全長蛋白的優(yōu)化密碼子片段，所述優(yōu)化密碼子片段的核苷酸序列如SEQ IDNO.3所示；
獲得HLA-G全長蛋白的表達(dá)工程菌：合成得到含有所述HLA-G全長蛋白的優(yōu)化密碼子片段的載體，以所述載體為模板，采用如SEQ ID NO.4-5所示的引物對進(jìn)行PCR，獲得HLA-G全長蛋白的優(yōu)化密碼子片段；將pET-28a-sumo載體采用CpoI /NotI雙酶切，獲得酶切載體；將所述HLA-G全長蛋白的優(yōu)化密碼子片段采用CpoI /NotI雙酶切，獲得酶切片段；將所述酶切載體與所述酶切片段進(jìn)行酶連，獲得HLA-G全長蛋白表達(dá)載體；用所述的HLA-G全長蛋白表達(dá)載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞，篩選轉(zhuǎn)化子，獲得所述HLA-G全長蛋白表達(dá)工程菌；
將所述的HLA-G全長蛋白表達(dá)工程菌經(jīng)誘導(dǎo)表達(dá)和純化制備得到HLA-G全長蛋白。
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