[發明專利]一種用于篩選雜交瘤細胞的選擇培養基及應用有效
| 申請號： | 202010957663.8 | 申請日： | 2020-09-14 |
| 公開（公告）號： | CN111808825B | 公開（公告）日： | 2020-12-25 |
| 發明（設計）人： | 肖志華;鄧鴻云 | 申請（專利權）人： | 上海奧浦邁生物科技股份有限公司 |
| 主分類號： | C12N5/20 | 分類號： | C12N5/20 |
| 代理公司： | 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245 | 代理人： | 陸惠中;田歡 |
| 地址： | 201321 上海*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 用于 篩選 雜交瘤 細胞 選擇 培養基 應用 | ||
1.一種用于篩選雜交瘤細胞的培養基，其特征在于，在HAT培養基中添加硫辛酸、硫酸膽堿，使用所述培養基篩選雜交瘤細胞，篩選獲得的雜交瘤細胞分泌抗體效價高。
2.根據權利要求1所述的培養基，其特征在于，添加硫辛酸、硫酸膽堿的含量分別為0.1-0.5mg/L、1-5mg/L。
3.根據權利要求1所述的培養基，其特征在于，所述HAT培養基的配方為每1.0mL RPMI1640培養基中含有次黃嘌呤（0.8-1.2）×10-4M，胸腺嘧啶核苷（1.5-1.7）×10-5M，氨甲蝶呤（3-5）×10-7M。
4.根據權利要求1所述的培養基，其特征在于，所述雜交瘤細胞為骨髓瘤細胞。
5.權利要求1所述的培養基在篩選雜交瘤細胞中的應用。
6.根據權利要求5所述的應用，其特征在于，所述應用為篩選分泌高效價抗體的雜交瘤細胞。
7.根據權利要求5-6任一項所述的應用，其特征在于，所述雜交瘤細胞為SP2/0細胞系與免疫的小鼠脾臟B細胞融合得到。
8.權利要求1-4任一項所述的培養基的制備方法，其特征在于，在RPMI 1640培養基中依次添加黃嘌呤、胸腺嘧啶核苷、氨甲蝶呤，使其終濃度分別為次黃嘌呤（0.8-1.2）×10-4M，胸腺嘧啶核苷（1.5-1.7）×10-5M，氨甲蝶呤（3-5）×10-7M，制備得到HAT培養基，再稱取適量硫辛酸、硫酸膽堿，溶解于無菌純化水，添加到所述HAT培養基中，使硫辛酸、硫酸膽堿的終濃度分別為0.1-0.5mg/L、1-5mg/L。
9.根據權利要求8所述制備方法，其特征在于，還包含將制備獲得的培養基采用濾膜濾過除菌。
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