[發明專利]一種珠芽魔芋花器組培獲得再生植株的方法有效

申請號：	202010694024.7	申請日：	2020-07-17
公開（公告）號：	CN111602596B	公開（公告）日：	2021-10-01
發明（設計）人：	潘登浪;李煒芳;曾憲海;林位夫;鄒積鑫;鄭定華;曾精;李哲	申請（專利權）人：	中國熱帶農業科學院橡膠研究所
主分類號：	A01H4/00	分類號：	A01H4/00
代理公司：	?？谙柘鑼＠聞沼邢薰?46001	代理人：	張耀婷
地址：	570000 ***	國省代碼：	海南;46
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摘要：
搜索關鍵詞：	一種珠芽魔芋花器組培獲得再生植株方法
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【權利要求書】：

1.一種珠芽魔芋花器組培獲得再生植株的方法，其特征在于，其步驟如下：

1)、外植體消毒：取珠芽魔芋佛焰苞未展花序，去除外層花芽鱗片，用飽和洗衣粉溶液清洗花序表面后沖洗干凈，在超凈工作臺中用75％酒精將整個花序表面均勻擦拭數次后，切開佛焰苞，切取花器；

2)、愈傷組織誘導：取珠芽魔芋花器接種到愈傷組織誘導培養基中，在24～28℃下暗培養獲得愈傷組織；

所述愈傷組織誘導培養基為改良MS、NH₄Cl 1000～1200mg/L、KNO₃ 2400～2600mg/L、Ca(NO₃)₂ 600～630mg/L、NaH₂PO₄ 150～170mg/L、MgSO₄·7H₂O 360～380mg/L、肌醇100～120mg/L、煙酸0.2～0.8mg/L、鹽酸吡哆醇0.1～3mg/L、鹽酸硫胺素0.5～5mg/L、氨基乙酸1.0～3.0mg/L、2,4-D 1～10mg/L、6-BA1～3mg/L、瓊脂5500～6500mg/L、蔗糖25000～35000mg/L、泛酸鈣1～5mg/L、生物素0.05～0.2mg/L，培養基滅菌前調其pH 5.8～6.2；

3)、擬球莖誘導與增殖

取上述愈傷組織接種到擬球莖誘導培養基中，在24～28℃下暗培養獲得擬球莖，獲得的擬球莖接種在相同成分的增殖培養基中進行增殖培養；

所述擬球莖誘導培養基和增殖培養基均為改良MS、NH₄Cl 1000～1200mg/L、KNO₃ 2400～2600mg/L、Ca(NO₃)₂ 600～630mg/L、NaH₂PO₄ 150～170mg/L、MgSO₄·7H₂O 360～380mg/L、肌醇100～120mg/L、煙酸0.2～0.8mg/L、鹽酸吡哆醇0.1～3mg/L、鹽酸硫胺素0.5～5mg/L、氨基乙酸1.0～3.0mg/L、TDZ 0.1～1mg/L、瓊脂5500～6500mg/L、蔗糖25000～35000mg/L、泛酸鈣1～5mg/L、生物素0.05～0.2mg/L，培養基滅菌前調其pH 5.8～6.2；

4)、擬球莖萌芽與生根誘導

取上述經過增殖的擬球莖切成單粒接種到萌芽與生根培養基中，在溫度為26～30℃，光照強度為1000～2000lx，光照周期為12h下培養獲得再生植株；

所述萌芽與生根培養基為改良MS、NH₄Cl 1000～1200mg/L、KNO₃ 2400～2600mg/L、Ca(NO₃)₂ 600～630mg/L、NaH₂PO₄ 150～170mg/L、MgSO₄·7H₂O 360～380mg/L、肌醇100～120mg/L、煙酸0.2～0.8mg/L、鹽酸吡哆醇0.1～3mg/L、鹽酸硫胺素0.5～5mg/L、氨基乙酸1.0～3.0mg/L、NAA0.1～0.5mg/L、瓊脂5500～6500mg/L、蔗糖25000～35000mg/L、泛酸鈣1～5mg/L、生物素0.05～0.2mg/L，培養基滅菌前調其pH 5.8～6.2；

所述改良MS是在MS的基礎上保留微量元素和鐵鹽，去除其它成分。

2.根據權利要求1所述的珠芽魔芋花器組培獲得再生植株的方法，其特征在于：所述花器是雄蕾或雌蕾。

3.根據權利要求1所述的珠芽魔芋花器組培獲得再生植株的方法，其特征在于：所述擬球莖誘導培養基和增殖培養基中添加有NAA，添加量在2mg/L以下。

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