[發明專利]β-煙酰胺單核酸的合成方法及其中間體有效
| 申請號: | 202010566477.1 | 申請日: | 2020-06-19 |
| 公開(公告)號: | CN111647635B | 公開(公告)日: | 2021-09-21 |
| 發明(設計)人: | 袁永紅 | 申請(專利權)人: | 理星(天津)生物科技有限公司 |
| 主分類號: | C12P19/30 | 分類號: | C12P19/30 |
| 代理公司: | 北京慕達星云知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11465 | 代理人: | 李冉 |
| 地址: | 300460 天津市濱*** | 國省代碼: | 天津;12 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 煙酰胺單 核酸 合成 方法 及其 中間體 | ||
1.一種制備β-煙酰胺單核酸的方法,其特征在于:所述的方法可以由(a)或(b)的任意一種制得:
(a):兩步酶解法
a1:以煙酰胺核糖和磷脂為底物,在鈣離子存在下,經磷脂酶D催化,生成磷脂酰煙酰胺核糖;
a2:以步驟a1生成的磷脂酰煙酰胺核糖為底物,在鈣離子存在下,在磷脂酶C的催化下,生成β-煙酰胺單核酸;
(b):一鍋法制備β-煙酰胺單核酸;
所述的一鍋法制備β-煙酰胺單核酸可以是(1)或(2)的任意一種:
(1):以煙酰胺核糖和磷脂為底物,在鈣離子存在下,先加入磷脂酶D進行反應,反應結束后,再加入磷脂酶C進行反應,獲得β-煙酰胺單核酸;
(2):以煙酰胺核糖和磷脂為底物,在鈣離子存在下,一并加入磷脂酶D和磷脂酶C進行反應,獲得β-煙酰胺單核酸。
2.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:所述的磷脂酰煙酰胺核糖為I:
其中,R1和R2為脂肪酰基。
3.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:所述的磷脂為天然磷脂或人工合成磷脂。
4.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:所述的磷脂酶C為生物體內普遍存在的磷脂酶C。
5.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:所述的磷脂酶D為生物體內普遍存在的磷脂酶D。
6.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:
所述a1中的煙酰胺核糖和磷脂摩爾用量比為1:10-10:1;
所述鈣離子在水中的濃度為0.01-20g/L;
所述磷脂酶D的催化反應溫度為20-70℃,反應pH為4.5-7.5。
7.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:所述磷脂酶D催化反應中還可以加入助劑,包括但不限于正已烷、正庚烷、異丙醇任意一種或二種以上的組合,其中,以重量用量比計算,助劑為正已烷或正庚烷,含量為0-50%,助劑為異丙醇,含量為0-30%。
8.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:所述a2鈣離子在水中的濃度為0.01-20g/L;所述磷脂酶C的催化反應溫度為20-70℃,磷脂酶C的反應pH為4.0-7.0。
9.根據權利要求8所述的方法,其特征在于:所述磷脂酶C催化反應中還可以加入烷烴和/或短鏈醇做助劑,其中烷烴選自正已烷、正庚烷中的一種或二種,短鏈醇選自甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丁醇、戊醇中的一種或二種,以重量用量比計算,助劑為烷烴,含量可為0-80%,助劑為短鏈醇,含量可為0-30%。
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