[發明專利]抗病草魚的制備方法及應用在審
| 申請號: | 202010481989.8 | 申請日: | 2020-06-01 |
| 公開(公告)號: | CN111543390A | 公開(公告)日: | 2020-08-18 |
| 發明(設計)人: | 羅琛;張軒杰;楊輝 | 申請(專利權)人: | 湖南海博水產種業科技有限公司 |
| 主分類號: | A01K67/027 | 分類號: | A01K67/027 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 410008 湖南省長*** | 國省代碼: | 湖南;43 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 抗病 草魚 制備 方法 應用 | ||
1.一種抗病草魚的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:
①、選種:選取健康、體型勻稱的性成熟雌親代草魚,做好標記,放入專用池塘中養殖;
②、親代感染養殖:往專用池塘中投入患有出血病的患病草魚,患病草魚對所有親代草魚進行感染,期間及時清除患病致死的親代草魚和患病草魚;
③、準備精子和卵子:選擇與草魚雜交致死的鯉魚精子,用2-4倍體積0-4℃的Hank’s溶液稀釋,置于兩支15W紫外滅菌燈下16cm處,照射70min,照射過程中不斷用搖床搖動精液并維持精液溫度在0-4℃,得到遺傳失活的鯉魚精子;期間,對親代草魚進行人工催產,獲得成熟的親代草魚卵子;
④、一代抗病草魚苗育苗:用遺傳失活的鯉魚精子激活親代草魚卵子,精卵接觸2min后,在4-6℃冷水中對被激活的草魚卵子進行冷休克15min,控制親代草魚卵子的減數分裂,使第二極體不能分離而獲得兩個基因組均來自母本同源染色體、無父本基因組的高純合的雌核二倍體草魚苗,即為一代抗病草魚苗;
⑤、一代抗病草魚苗感染養殖:在一代抗病草魚苗的一齡階段,投入患有出血病的患病草魚,對所有一代抗病草魚苗進行感染,篩選出健康的雌性一代抗病草魚苗,采用人工催產,養殖獲得性成熟的一代抗病草魚,之后,對一代抗病草魚進行人工催產,獲得成熟的一代草魚卵子;
⑥、二代抗病草魚苗育苗:用遺傳失活的鯉魚精子激活一代草魚卵子,精卵接觸2min后,在4-6℃冷水中對被激活的草魚卵子進行冷休克15min,控制一代草魚卵子的減數分裂,使第二極體不能分離而獲得兩個基因組均來自母本同源染色體、無父本基因組的高純合的雌核二倍體草魚苗,即為二代抗病草魚苗;
⑦、篩選種苗:在二代抗病草魚苗的一齡階段,再次投入患有出血病的患病草魚,對二代抗病草魚苗進行感染,篩選出健康的二代抗病草魚苗,即為最終的抗病草魚純系;
⑧、純系鑒定:在抗病草魚純系群體中隨機取30條個體的尾鰭樣品,以及對照的鯉魚和草魚各一條的尾鰭樣品,通過多態性分子標記對其基因組進行廣泛的掃描分析和比較,確定抗病草魚純系基因組的純合性和一致性,群體中無外源草魚的混入后,才可用于大規模抗病草魚苗種生產。
2.根據權利要求1所述的一種抗病草魚的制備方法,其特征在于,步驟③和⑤步驟中,所述人工催產方法為:對草魚注射催產藥物,獲得發育成熟的卵子。
3.根據權利要求2所述的一種抗病草魚的制備方法,其特征在于,所述催產藥物為促黃體素釋放激素類似物LRH-A2和魚類腦垂體PG按重量比2∶1混合而成。
4.根據權利要求2所述的一種抗病草魚的制備方法,其特征在于,所述催產藥物的注射量為:每kg雌性草魚注射催產藥物120μg。
5.根據權利要求1所述的一種抗病草魚的制備方法,其特征在于,步驟①中,親代草魚的體重大于同齡草魚平均體重10-20%。
6.根據權利要求1所述的一種抗病草魚的制備方法,其特征在于,步驟②中,患病草魚的投放量占總量的20%,養殖30天。
7.根據權利要求1所述的一種抗病草魚的制備方法,其特征在于,步驟⑤和⑦中,患病草魚的投放量占總量的5%,養殖20天。
8.權利要求1-7中任意一項所述的一種抗病草魚的制備方法的應用,其特征在于,適用于使用所述抗病草魚的制備方法而獲得的抗病草魚純系。
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