一種同時測定富硒水果中五種硒形態的檢測方法，屬于食品領域。首先，將樣品在?40℃以下冷凍干燥，充分使植物細胞破壁，保持水果中硒形態不發生變化，硒的不同形態能夠被充分提取；其次，建立以0.2％檸檬酸為提取劑，50℃水浴振蕩提取4h的提取方法；最后，建立以0.1％檸檬酸?氨水為流動相體系(pH＝5),離子色譜?電感耦合等離子體質譜法聯用(IC?ICP?MS)同時測定富硒水果中5種硒形態的檢測方法。本發明對富硒水果中硒元素的來源，及在水果中的富集、轉換和遷移有重要意義，目前國家標準尚無針對具體硒形態的檢測技術標準。另外，本發明具有試劑用量少、操作簡單、提取率高、分析時間短、檢出限低、穩定性好、檢測準確等特點，解決和彌補現有檢測方法的不足。

技術領域

本發明屬于食品領域，涉及一種測定富硒水果中五種硒的檢測方法。

背景技術

目前硒的檢測國家標準主要有GB 5009.93-2017《食品中硒的測定》，該方法是對食品中總硒的測定，不能對硒的形態進行分析，從而不能正確的了解和評價富硒水果中硒的形態分布，以及對人體健康的作用。

本發明建立了以檸檬酸(2g/L)為提取試劑，恒溫水域振蕩法作為提取方法，樣品溶液經離子色譜(IC)分離后，用電感耦合等離子體質譜法(ICP-MS)測定，方法簡單快速，可以測定富硒水果中兩種無機硒和三種有機硒。

發明內容

由于水果中硒含量較低，硒形態難以提取。針對現有技術存在的問題，本發明提供一種同時測定富硒水果中五種硒形態的檢測方法，解決了富硒水果中硒形態的提取和檢測的技術問題，將方法檢出限提高了近10倍，提取率也有了較大提升。

為了達到上述目的，本發明采用檢測步驟如下：

一種同時測定富硒水果中五種硒形態的檢測方法，包括以下步驟：

(1)配制溶液

①2g/L檸檬酸溶液：稱取2g檸檬酸，用水稀釋至1000mL；

②1g/L檸檬酸溶液：稱取1g檸檬酸，用水稀釋至1000mL。

(2)配制標準溶液

①五種硒的標準品：純度＞99％的硒代氨基酸標準品，包括硒代胱氨酸[SeCys2]、硒代半胱氨酸[SeCys]、硒代蛋氨酸[SeMet]。濃度為1000mg/L的亞硒酸根標準溶液[Se(IV)]、硒酸根標準溶液[Se(VI)]；

②混合標準中間液：分別準確稱取亞硒酸根標準溶液[Se(IV)]、硒酸根標準溶液[Se(VI)]和硒代氨基酸標準品適量，配置成濃度為1mg/L的硒混合標準儲備液(以硒計)；

③基質匹配混合標準工作溶液：分別準確吸取混合標準中間液各0.25mL、0.5mL、1mL、2mL、4mL于50mL容量瓶中，用1g/L檸檬酸溶液稀釋至刻度，搖勻，作為系列基質匹配標準工作溶液，硒標準溶液濃度依次為5μg/L、10μg/L、20μg/L、40μg/L、80μg/L。

(3)樣品的前處理方法(制備樣品溶液)

①樣品預處理：將富硒水果樣品清洗干凈，粉碎后在-40℃冷凍干燥機冷凍干燥，干燥后的樣品研磨成粉后備用。

②樣品溶液的制備：稱取干燥后的樣品0.5g于刻度離心管中，加入20mL檸檬酸(2g/L)混勻，置于50℃恒溫水浴中振蕩提取4h后，取出后定容至25mL，于10000r/min下離心10min，收集上清液5mL加入正己烷1mL渦旋混合，收集水相試液過0.22μm水膜后備用。

(4)離子色譜-電感耦合等離子體質譜分析參考條件

①離子色譜分離條件