本發明公開了PAX6基因或其表達產物在制備抑制纖維化的藥物中的應用。本發明的實驗證實PAX6能夠通過抑制纖維化促進因子TGFβ，促進纖維化抑制因子IL1R2、CXCL10，從而起到保護心臟抑制纖維化的作用，因此PAX6在心臟中是一個潛在的全新的治療心臟纖維化從而預防心衰的重要靶點。

技術領域

本發明涉及基因領域，尤其涉及PAX6基因或其表達產物在制備抑制纖維化的藥物中的應用。

背景技術

心臟纖維化是大量心臟疾病中常見的一種重要的病理過程。心臟纖維化最主要的特點是心肌中細胞外基質的大量聚集。細胞外基質的過度沉積會導致心臟順應性降低以及舒張功能障礙。心臟纖維化的進一步發展會導致心輸出量的降低最終導致心力衰竭。心臟成纖維細胞是心肌組織中提供結構支持的主要細胞類型。在各種類型的心臟損傷下，心臟成纖維細胞可被激活分化為肌成纖維細胞，從而具有更有效的分泌細胞外基質蛋白的兼具成纖維細胞以及平滑肌細胞特性的特殊細胞類型。重要的是，調控心臟成纖維細胞分化從而促進細胞外基質沉積的分子機制尚未完全闡明。

轉錄因子PAX6的基因定位在染色體11p13區域，它是一個在演化過程中高度保守的PAIRED BOX家族的成員。全長的PAX6包含422個氨基酸，它的蛋白結構特點是包含一個長配對結構域(long paired domain，PD)以及一個同源異性結構域(homeodomain，HD)，并且有兩個DNA結合域。關于PAX6目前的研究主要圍繞在眼睛、中樞神經系統、胰島細胞、嗅覺系統的早期發育過程中。然而關于PAX6在心臟中，特別是心臟成纖維細胞中的作用尚不清楚。值得注意的是，一項研究報道了轉錄因子PAX6對于DNA的結合活性在生理性和病理性心肌肥大中具有相反的調節作用。生理性肥厚的特點是收縮功能正常或者增強，心臟結構和組織結構均正常。相反的，病理性肥大常常伴隨著纖維化重塑的增加，以及其他經常發展為心力衰竭的細胞功能障礙。因此，以上內容提示PAX6可能在心臟纖維化的過程中發揮作用。通常認為TGFβ在多種組織和器官中是促纖維化因子。在晶狀體中，TGFβ誘導上皮間質轉化，研究發現在此過程中PAX6表達水平降低。另外，有研究報道在神經外胚層發育過程中，PAX6可能通過激活miR135b的作用從而抑制TGFβ和BMP信號通路。然而，PAX6能否抑制心臟纖維化成為一個全新的臨床治療心臟纖維化的靶點尚不得而知，亟需進一步的研究。

發明內容

本發明的目的在于提供一種新的抑制細胞纖維化的藥物。為了實現本發明的目的，擬采用如下技術方案：

本發明的目的之一是提供PAX6基因或其表達產物在制備抑制纖維化的藥物中的應用。本申請的發明人通過生物化學、分子生物學、細胞學研究手段，研究發現PAX6表達水平在小鼠以及小鼠成纖維細胞纖維化模型等病理模型中顯著下降。后續使用小干擾RNA的技術手段通過小干擾RNA轉染成纖維細胞的方式，利用siRNA敲減降低細胞PAX6蛋白水平，從而明確PAX6對小鼠心臟功能的作用。這一發現是本申請的發明人首次發現的，并且是出乎意料的。

本發明另一方面涉及PAX6基因表達促進劑在制備抑制纖維化的藥物中的應用。

對于PAX6基因表達促進劑而言，沒有特別的限定，包括但不限于過表達PAX6、含有PAX6基因的載體。有報道高胰島素水平會上調Pax6表達，同樣IGF-2也可以。有報道microRNA可以促進PAX6基因表達，例如過表達miR-7、miR-375以及拮抗miR-365均可促進PAX6基因表達。因此，PAX6基因表達促進劑還可以包括胰島素上調劑、IGF-2、過表達miR-7、miR-375以及拮抗miR-365等。在本發明的一個優選實施方式中，所述的纖維化是指心臟纖維化、胰臟纖維化或肺臟纖維化。

雖然本發明的發現優選應用于人體或動物體的細胞纖維化，但是，本發明還涉及PAX6基因或其表達產物在抑制體外心臟成纖維細胞增殖中的應用。

本發明同樣還涉及PAX6基因敲除試劑在促進體外心臟成纖維細胞增殖中的應用。