本發明公開了一種從ScFv噬菌體抗體庫中以THY?1/CD90為靶點篩選出的全人源拮抗抗體，該全人源拮抗抗體為單鏈抗體，全人源拮抗抗體重鏈DNA序列如SEQ ID NO:1所示，輕鏈DNA序列如SEQ ID NO:2所示，重鏈氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示，輕鏈氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示。上述技術方案，從人ScFv噬菌體抗體庫中篩選以THY?1/CD90為靶點的全人源拮抗抗體，并分別測定其DNA序列和氨基酸序列，通過該方法獲得的全人源拮抗抗體具有靶向THY?1/CD90的特異性。這樣產生的抗體能夠克服雜交瘤技術生產抗體的缺點，還能實現高通量、快速篩選抗體的目的，且價格低廉。

技術領域

本發明涉及拮抗抗體技術領域，具體涉及一種從ScFv噬菌體抗體庫中以THY-1/CD90為靶點篩選出的全人源拮抗抗體。

背景技術

THY-1(胸腺細胞抗原-1)又叫CD90，是一種高度保守的糖蛋白。目前在神經細胞、胸腺細胞、成纖維細胞亞群、內皮細胞、腎小球系膜細胞、造血干細胞等表面均有發現。THY-1可以調節細胞-細胞、細胞-細胞質之間的反應，在神經再生和轉移、炎癥以及纖維化中起重要作用。Lee報道THY-1是一個新穎的炎癥細胞因子促血管生成的標志；Bradley JE和Rege TA兩個研究小組分別報道THY-1與一些疾病的血管生成關系密切。

近年來一些文獻報道：從人組合抗體庫中采用噬菌體展示等技術能篩選出以細胞膜受體之天然配體為靶點的抑制劑或激活劑，這些抑制劑或激活劑的化學本質是抗體。不僅結構穩定(避免藥物在到達病灶前，在體內被提前降解)，且靶向性良好(可大大減少毒副作用)，更為重要的是：這樣產生的抗體能夠克服雜交瘤技術生產抗體的缺點(易引起排異反應、制備過程復雜、融合效率不高、抗體產量低、抗體不穩定，穿透力弱)，還能實現高通量、快速篩選抗體的目的，且價格低廉。

雖然有上述報道，但至今未見從ScFv噬菌體抗體庫中采用噬菌體展示等技術篩選以THY-1為靶點的抑制劑抗體的文獻。相比現有治療RA的抗體類藥物來說，THY-1的抗體類抑制劑藥物還處于年輕的上升階段，有很大的開拓空間。而THY-1與一些疾病的相關性以及THY-1抑制劑對相關疾病的抑制作用，預示著THY-1的抗體類抑制劑的研究有著誘人的前景。

發明內容

針對現有技術存在的不足，本發明的目的在于提供一種從ScFv噬菌體抗體庫中以THY-1/CD90為靶點篩選出的全人源拮抗抗體，該全人源抗體具有作用于THY-1/CD90的靶向特異性，為其抑制劑。

為實現上述目的，本發明提供了如下技術方案：一種從ScFv噬菌體抗體庫中以THY-1/CD90為靶點篩選出的全人源拮抗抗體，該全人源拮抗抗體為單鏈抗體，全人源拮抗抗體重鏈DNA序列如SEQ ID NO:1所示，輕鏈DNA序列如SEQ ID NO:2所示，重鏈氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示，輕鏈氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示。

作為優選的：重鏈DNA序列SEQ ID NO:1用于編碼重鏈氨基酸序列SEQ ID NO:3，輕鏈DNA序列SEQ ID NO:2用于編碼輕鏈氨基酸序列SEQ ID NO:4。

作為優選的：通過測序來確定全人源拮抗抗體的DNA序列和氨基酸序列，通過分別測定全人源拮抗抗體的DNA序列和氨基酸序列，從而獲得的全人源拮抗抗體具有靶向THY-1/CD90的特異性。

作為優選的：全人源拮抗抗體篩選流程包括以下步驟：

(1)抗原檢測：SDS-PAGE或其他方法檢測抗原質量；

(2)質量控制：對用于篩選的ScFv抗體庫進行質量控制；

(3)抗體篩選：4輪淘洗，篩選Binding的ScFv抗體；

(4)結合噬菌體檢測；