本發明涉及一種貝殼生長基及非損傷觀察絲狀體的方法，所述貝殼生長基由白色貝殼用稀酸處理至厚度不超過0.15毫米，然后讓絲狀體在貝殼中生長。進而，所述非損傷觀察絲狀體的方法將貝殼絲狀體放置在培養液中用顯微鏡觀察紫菜貝殼絲狀體的生長發育，不需要使用有傷害作用的溶殼劑處理貝殼絲狀體，還可以長時間連續觀察絲狀體的生長情況。采用本發明提供的方法能夠簡單、便捷地大量制備透明的貝殼生長基，并可非損傷原位觀察紫菜貝殼絲狀體，可以清晰地連續觀測記錄紫菜貝殼絲狀體的生長發育情況，為發展絲狀體相關生產技術奠定基礎。本方法也可用于紅毛菜等生活史包括貝殼絲狀體階段的藻類。

技術領域

本發明涉及絲狀體的育苗技術領域，尤其是一種貝殼生長基及非損傷觀察絲狀體的方法。

背景技術

紫菜和紅毛菜等經濟海藻的生活史包括絲狀體世代，例如紫菜絲狀體和紅毛菜絲狀體。以紫菜絲狀體為例，其屬于紫菜生活史中的微觀世代，紫菜生活史分為二倍體的絲狀體時期和單倍體的葉狀體時期。紫菜絲狀體能夠溶解鈣質，鉆入富含鈣質的貝殼中，形成貝殼絲狀體渡過夏季高溫。貝殼絲狀體在秋季成熟然后釋放殼孢子，在成熟過程中的每個階段，對光、溫和營養鹽都有特殊需求。近年來，壇紫菜的養殖出現“南育北養”的需求，對工廠化培育貝殼絲狀體提出了新要求。及時準確了解貝殼絲狀體的生長發育情況、或了解貝殼絲狀體的病害發展狀況是工廠化育苗的核心工作。

目前常用的觀察貝殼絲狀體的方法是：用強酸配制的化學試劑將貝殼溶解，然后將絲狀體從殼面上刮下來觀察。顯然這種方法既不方便，也會對藻體造成損傷，因此無法準確地了解貝殼絲狀體的生長情況?，F有技術中柏蘭尼液常常作為溶殼劑用于溶解貝殼絲狀體的表層，溶解后可以將絲狀體從貝殼表層刮下來，用于觀察貝殼絲狀體的生長狀況(曾呈奎1985海藻栽培學)。例如發明專利申請CN 110313395A用柏蘭尼液浸泡貝殼90秒后刮取絲狀體。柏蘭尼液原料為具有強腐蝕性的強酸(10％硝酸和0.5％鉻酸)和對生物活體有強傷害作用的有機溶劑(95％乙醇)，顯然對絲狀體活體有極大傷害，導致無法準確描述絲狀體在貝殼中的生長發育。

此外，發明專利申請CN 109863993A采用打磨法去除貝殼外表面深色表層和內表面反光珍珠層，留下半透明的殼體，也可以觀察到貝殼絲狀體。打磨法顯然耗時費力，成本較高，而且無法將貝殼打磨到特別薄。

觀察貝殼絲狀體的傳統方法需將貝殼脫離海水培養基進行觀察，而絲狀體不耐失水，離開海水30分鐘就造成部分絲狀體脫水死亡，因此無法長時間觀察。

發明內容

本發明的目的是為了克服現有的絲狀體觀察需要用強酸溶解并且刮下絲狀體，導致絲狀體受到嚴重傷害，提供一種貝殼生長基，其以白色貝殼為原料加工而成，所述貝殼生長基至少有一處透明區域，所述透明區域的最大處的厚度不超過0.15毫米，并且所述透明區域的透光率≥40％。

本發明選用白色較薄貝殼為原料可以方便后續透明化處理，采用這種貝殼生長基的優勢在于，可以直接原位觀察貝殼絲狀體活體的生長發育。

而本發明采用稀酸浸泡的方法，可以大批量、迅速地獲得更薄(小于0.15毫米)更透明的貝殼。

本發明所述稀酸浸泡浸泡所述貝殼生長基，目的是進一步讓貝殼變薄，并且有利于出現透光率≥40％的透明區域。對于本身比較薄的貝殼，例如扇貝殼，厚度一般在0.3～0.5mm左右，以H⁺濃度為0.1-1mol/L的稀酸，浸泡時間為30分鐘到1個小時，即完成酸浸泡過程。

對于較厚的大貝殼，例如河蚌殼，厚度一般在1-3mm。采用沿垂直貝殼表面的方向切割成長條，例如10cm*2cm，切割的薄片以H⁺濃度為0.1-1mol/L的稀酸，浸泡時間為30分鐘到1個小時，即完成酸浸泡過程。

需要說明的是，本發明所述稀酸為鹽酸水溶液、硫酸水溶液或磷酸水溶液中至少一種。優選地，所述稀酸中H+濃度為0.1-1mol/L，浸泡時間為0.5-1個小時。