本發明公開了一種羅布麻的組織培養高效快速繁殖方法，包括羅布麻莖段外植體的獲得、羅布麻莖段外植體的消毒滅菌、羅布麻莖段增殖培養基的篩選、羅布麻生根培養等步驟。本發明極大地提高了羅布麻植株的繁殖系數，可以高達8.6；同時有利于保持羅布麻植株的優良特性，可以短時間內獲得大量羅布麻材料，不受時間季節限制，達到周年供應羅布麻種苗，為羅布麻優良株系的規模化生產提供了有力的技術保障和支持，可滿足我國市場對優質羅布麻種苗的大量需求，經濟效益與社會效益顯著。

技術領域

本發明涉及一種羅布麻的組織培養繁殖方法。

背景技術

羅布麻(Apocynum venetum L.) 是一種抗逆性強、適應性廣、耐鹽堿的野生優良水土保持植物，具有很高的藥用價值、纖維價值和生態價值，是干旱、鹽堿、沙漠地區最具開發潛力和利用價值的植物品種之一。

近年來，我國羅布麻紡織和羅布麻茶發展迅猛，但面臨原料短缺的困境。人工種植是解決羅布麻原料短缺問題的有效措施，但必須首先解決繁殖方法和育苗移栽效率等問題。羅布麻常規的繁殖方法有種子播種育苗、繁殖分株、切根等，但存在種苗質量不一致、繁殖系數低、繁殖周期長等缺點。

發明內容

本發明的目的在于提供一種可加快羅布麻的繁殖速度、提高繁殖系數、縮短繁殖周期的羅布麻的組織培養高效快速繁殖方法。

本發明的技術解決方案是：

一種羅布麻的組織培養高效快速繁殖方法，其特征是：包括下列步驟：

（1）羅布麻莖段外植體的獲得

在晴朗無風天氣的上午9：00-10：00點，剪取帶有葉子的羅布麻莖段，去除葉子后將其剪成2~3cm長度的莖段，然后放到盛有無菌水的小燒杯中，帶回實驗室備用；

（2）羅布麻莖段外植體的消毒滅菌

在超凈工作臺上，將羅布麻莖段放入已滅菌的三角瓶中，先用75%的酒精浸泡消毒30秒，不斷晃動三角瓶，接著用無菌水沖洗1-2次，然后用0.1%的升汞消毒9min，再用無菌水沖洗4-5次；然后將其接種在初代培養基MS + 6-BA 0.6mg/L + NAA 0.1mg/L+蔗糖30g/L +瓊脂7.5g/L上，放置于溫度26℃、光照強度為2000lux、每天光照時間為16h的培養室內進行培養；

（3）羅布麻莖段增殖培養基的篩選

設計不同濃度的6-BA和NAA進行組合，選取初代培養20天后生長健壯的新梢，剪取2cm大小的莖尖將其接種在不同種類的培養基上進行增殖，培養20d后觀察羅布麻莖尖的生長狀態和統計其增殖系數，最終確定最佳的增殖培養基為MS + 6-BA 3mg/L +TDZ0.1mg/L+NAA 0.1mg/L+蔗糖30g/L + 瓊脂7.5g/L；

（4）羅布麻生根培養

待羅布麻增殖幼芽長到2-3cm時，在超凈工作臺上切下幼芽，將其轉入生根培養基1/2MS+NAA0.5mg/L上進行培養，培養20天后可獲得大量生根的試管苗。

步驟（1）中去除葉子后將其剪成2cm長度的莖段。

本發明極大地提高了羅布麻植株的繁殖系數，可以高達8.6；同時有利于保持羅布麻植株的優良特性，可以短時間內獲得大量羅布麻材料，不受時間季節限制，達到周年供應羅布麻種苗，為羅布麻優良株系的規模化生產提供了有力的技術保障和支持，可滿足我國市場對優質羅布麻種苗的大量需求，經濟效益與社會效益顯著。

附圖說明

下面結合附圖和實施例對本發明作進一步說明。

圖1是羅布麻莖段離體快繁體系的建立示意圖。