本發(fā)明屬于醫(yī)學(xué)免疫學(xué)和腫瘤學(xué)領(lǐng)域，公開(kāi)了一種原發(fā)性肝癌相關(guān)抗原的胸腺依賴性淋巴細(xì)胞抗原表位肽及其應(yīng)用，抗原表位肽分別是由HLA?A0201、HLA?A1101、HLA?A2402、HLA?A3101、HLA?A0206、HLA?A0207、HLA?A3303、HLA?A3001、HLA?A0203、HLA?A1102、HLA?A0301、HLA?A0101、HLA?A2601分子限制性的抗原肽，共110種，可以特異性地與細(xì)胞毒性胸腺依賴性淋巴細(xì)胞結(jié)合，刺激后者活化、增殖和分化，從而發(fā)揮抗腫瘤的免疫效應(yīng)作用；這些抗原肽可以用來(lái)制備肝癌的治療性和預(yù)防性疫苗，也可以用來(lái)制備檢測(cè)肝癌相關(guān)抗原特異性細(xì)胞毒型胸腺依賴性淋巴細(xì)胞的檢測(cè)試劑，在肝癌的預(yù)防、治療和診斷中有著潛在的應(yīng)用價(jià)值。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于醫(yī)學(xué)免疫學(xué)和腫瘤學(xué)領(lǐng)域，特別涉及三種原發(fā)性肝癌相關(guān)抗原的胸腺依賴性淋巴細(xì)胞抗原表位肽及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

原發(fā)性肝癌是我國(guó)第4位常見(jiàn)惡性腫瘤和第3位腫瘤致死病因，嚴(yán)重威脅我國(guó)人民的生命和健康。原發(fā)性肝癌的病理類型，主要是肝細(xì)胞癌(hepatocellular?carcinoma,HCC)，占到85％～90％；還有少數(shù)為肝內(nèi)膽管癌(intrahepatic?cholangiocarcinoma,ICC)和HCC-ICC混合型等，三者在發(fā)病機(jī)制、生物學(xué)行為、分子特征、臨床表現(xiàn)、病理組織學(xué)形態(tài)、治療方法以及預(yù)后等方面差異較大。

在我國(guó)，HCC的高危人群主要有乙型肝炎病毒(hepatitis?B?virus,HBV)和/或丙型肝炎病毒(hepatitis?C?virus,HCV)感染、長(zhǎng)期酗酒(酒精性肝病)、非酒精脂肪性肝炎、食用黃曲霉毒素污染的食物、多種原因引起的肝硬化以及有肝癌家族史的人群，同時(shí)，年齡40歲以上的男性風(fēng)險(xiǎn)較大。近年的研究提示糖尿病、肥胖和吸煙等也是HCC的危險(xiǎn)因素，值得關(guān)注。

AFP、GPC3、GP73是常見(jiàn)的幾種在肝癌中存在過(guò)表達(dá)的腫瘤相關(guān)抗原，在肝癌的診斷、治療、病程監(jiān)測(cè)等發(fā)面被廣泛研究。血清甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)陽(yáng)性，是指AFP≥400μg，且排除慢性或活動(dòng)性肝炎、肝硬化、睪丸或卵巢胚胎源性腫瘤以及妊娠等，高度懷疑肝癌。AFP低度升高者，應(yīng)進(jìn)行動(dòng)態(tài)觀察，并與肝功能變化對(duì)比分析。約30％的肝癌患者AFP水平正常，應(yīng)檢測(cè)甲胎蛋白異質(zhì)體。GPC3是硫酸類肝素糖蛋白之一，高表達(dá)于原發(fā)性肝癌組織中，而其他正常組織中基本不表達(dá)或呈低表達(dá)。GPC3能夠促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖、分化，通過(guò)結(jié)合細(xì)胞外基質(zhì)、蛋白酶以及生長(zhǎng)因子等，對(duì)肝癌腫瘤的形成、生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移發(fā)揮了促進(jìn)作用。GP73是一種高爾基體II型跨膜蛋白，生理情況下在肝細(xì)胞中表達(dá)稀少。檢測(cè)原發(fā)性肝癌患者血清GP73水平發(fā)現(xiàn)其呈顯著高表達(dá)，且GP73的表達(dá)與患者肝功能和病情呈負(fù)相關(guān)，是肝細(xì)胞破壞嚴(yán)重程度的有效指標(biāo)之一。本專利選用此三種肝癌相關(guān)腫瘤抗原進(jìn)行研究。

細(xì)胞毒性T細(xì)胞(Cytotoxic?T?lymphocyte,CTL)是介導(dǎo)適應(yīng)性免疫應(yīng)答的核心細(xì)胞，在抗感染、抗腫瘤以及超敏反應(yīng)和自身免疫病的發(fā)生中起著至關(guān)重要的作用，其細(xì)胞膜上的?T細(xì)胞受體(T?cell?receptor,TCR)能夠特異性識(shí)別并結(jié)合抗原遞呈細(xì)胞表面MHC?I類分子與抗原肽的復(fù)合物，即MHC/抗原肽復(fù)合體分子。CTL表位是指與MHC?I類分子結(jié)合的抗原肽，是抗原分子中能被TCR特異性識(shí)別的線性片段或空間構(gòu)象性結(jié)構(gòu)，是引起免疫應(yīng)答反應(yīng)的基本抗原單位，在CTL活化過(guò)程中扮演著關(guān)鍵角色。