本發(fā)明提供了GBGT1基因在急性心肌梗死風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)標(biāo)記物中的用途，以GBGT1基因和或基因的表達(dá)產(chǎn)物作為一種新的急性心肌梗死風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)和診斷治療靶點(diǎn),利用基因及其表達(dá)產(chǎn)物制備急性心肌梗死風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)標(biāo)記物和診斷制劑,具有重要的臨床應(yīng)用意義和開(kāi)發(fā)價(jià)值。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明公開(kāi)一種提供了GBGT1基因在急性心肌梗死風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)標(biāo)記物中的用途，為明確冠心病患者患心肌梗死疾病的風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)評(píng)估，涉及基因診斷和生物醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種外周血心肌梗死標(biāo)志物檢測(cè)及其應(yīng)用，更具體是指基因表達(dá)產(chǎn)物和生物制劑在制備心肌梗死預(yù)測(cè)和診療藥物中的應(yīng)用，屬于基因診斷和生物制藥技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

冠心病在美國(guó)和許多發(fā)達(dá)國(guó)家排在死亡原因的第一位。預(yù)計(jì)在接下來(lái)的幾十年，它也是全球主要的死因尤其是，在冠心病的進(jìn)程中潛在致命的急性心肌梗死風(fēng)險(xiǎn)。然而，美國(guó)從20世紀(jì)60年代開(kāi)始，出現(xiàn)冠心病死亡率下降趨勢(shì)。得益于美國(guó)所進(jìn)行的降低冠心病危險(xiǎn)因素的努力，主要是控制危險(xiǎn)因素和改進(jìn)心肌梗死的治療方法。冠狀動(dòng)脈是唯一供給心臟血液的血管，其形態(tài)似冠狀，故稱(chēng)為冠狀動(dòng)脈。這條血管也隨年齡環(huán)境及自身遺傳基因的改變同全身血管一樣的硬化，呈粥樣改變，造成供養(yǎng)心臟血液循環(huán)障礙，引起心肌缺血、缺氧，即為冠心病。

大量的流行病學(xué)研究證實(shí)了吸煙，糖尿病，高脂血癥，高血壓，肥胖作為冠心病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。此外，針對(duì)以上這些風(fēng)險(xiǎn)因素的治療措施已經(jīng)證實(shí)可以有效地降低未來(lái)冠狀動(dòng)脈硬化性心臟病事件的風(fēng)險(xiǎn)。由于其在冠心病發(fā)病中的作用，這5個(gè)危險(xiǎn)因素常常被稱(chēng)為“傳統(tǒng)的”危險(xiǎn)因素。雖然這些冠心病發(fā)展中的傳統(tǒng)危險(xiǎn)因素的重要性是公認(rèn)的，但通常認(rèn)為，存在50%左右的冠心病患者并沒(méi)有這些傳統(tǒng)危險(xiǎn)因素參與。這就說(shuō)明，其他的非傳統(tǒng)危險(xiǎn)因素、遺傳因素、環(huán)境因素在冠心病中同樣發(fā)揮了重要作用。而冠心病和其他慢性病同樣是復(fù)雜的多基因共同作用的多基因疾病，正因?yàn)閷?dǎo)致冠心病的病因繁多，所以直到如今，尚不能精準(zhǔn)地預(yù)測(cè)和預(yù)防心肌梗死的發(fā)生，而需要更為有效的檢測(cè)手段。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明一種提供了GBGT1基因在急性心肌梗死風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)標(biāo)記物中的用途，目的在于為已經(jīng)明確診斷為冠心病患者供一種心肌梗死風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)，所述急性心肌梗死風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)和診斷制劑檢測(cè)GBGT1基因和或基因的表達(dá)產(chǎn)物。進(jìn)一步的，所述的GBGT1基因和或基因的表達(dá)產(chǎn)物在急性心肌梗死外周血中高表達(dá)。更進(jìn)一步的，所述的GBGT1基因和或基因的表達(dá)產(chǎn)物的表達(dá)水平熒光定量檢測(cè)方法。

本發(fā)明的目的在于所述急性心肌梗死風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)和診斷制劑檢中GBGT1基因和或基因的表達(dá)產(chǎn)物的表達(dá)量高低，采用基因芯片、外周血中基因的表達(dá)檢測(cè)方法、熒光定量方法、相關(guān)的生物制劑。

本發(fā)明中GBGT1基因首先設(shè)計(jì)熒光定量PCR檢測(cè)中使用的引物對(duì)，其序列如下：

上游引物序列：5’GGACTACCTCTTCTGCTTGAT 3’；

下游引物序列：5’CCTTCGCTGTCTGCCACAA 3’。

GBGT1基因引物需要在特定條件及體系下發(fā)揮作用，本發(fā)明中GBGT1基因熒光定量PCR檢測(cè)體系及反應(yīng)條件：

GBGT1熒光定量PCR反應(yīng)體系：

20ul的反應(yīng)體系，每個(gè)反應(yīng)包括：10ul的SYBRPremix Ex Taq TM，上、下游引物各0.5ul（濃度為10umol/L），無(wú)核酸酶的雙蒸水8ul，cDNA模板1ul；熒光定量PCR反應(yīng)條件：應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)擴(kuò)增；反應(yīng)條件為95℃預(yù)變性5分鐘；35個(gè)循環(huán)：95℃變性30秒，58℃退火30秒，72℃延伸20秒；溶解曲線(xiàn)和擴(kuò)增曲線(xiàn)95℃1分鐘，55℃30秒，95℃30秒；以GAPDH基因（一個(gè)在體內(nèi)恒定表達(dá)的基因，和GBGT1基因作為對(duì)照）為內(nèi)參基因，所有樣本至少重復(fù)測(cè)量三次，結(jié)果取均值。