本發(fā)明涉及一種SSR分子標(biāo)記引物、仙草品種的鑒定方法及試劑盒。該SSR分子標(biāo)記引物用于擴(kuò)增分子標(biāo)記，仙草的分子標(biāo)記選自SSR80位點、SSR82位點、SSR83位點、SSR100位點、SSR102位點及SSR106位點中的至少一種。通過上述SSR分子標(biāo)記引物能夠快速、準(zhǔn)確地確定仙草的品種。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及分子生物技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種SSR分子標(biāo)記引物、仙草品種的鑒定方法及試劑盒。

背景技術(shù)

仙草(Mesona?chinensis?Benth)又名仙人草、涼粉草，為唇形科涼粉草屬一年生草本宿根植物，是我國南方和東南亞國家的重要保健食品，國內(nèi)主要產(chǎn)地包括臺灣、浙江、江西、廣東、福建和廣西西部。仙草味甘微澀，性寒涼，自古以來被用作消暑解渴、涼血之良藥。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，仙草具有抗氧化、降血壓、降血糖、降血脂、抗菌等多種功效。仙草主要用于涼茶和仙人凍的加工生產(chǎn)，但兩種用途對仙草的原料要求不同。

不同仙草品種中多糖的含量相差很大，這些差異直接影響仙草的食用品質(zhì)和生產(chǎn)用途，因此仙草品種鑒定和純度鑒定工作非常重要。人們早期采用形態(tài)學(xué)特征作為仙草品種鑒定依據(jù)。然而這種鑒定方法依賴于鑒定人員的長期經(jīng)驗積累，容易受環(huán)境和主觀因素的影響，費時費力且準(zhǔn)確度無法保證。因此建立一套快速、精準(zhǔn)、經(jīng)濟(jì)的仙草品種鑒定技術(shù)，對于仙草產(chǎn)業(yè)的發(fā)展非常重要。

發(fā)明內(nèi)容

基于此，針對目前仙草品種鑒定時的費時費力且準(zhǔn)確度無法保證的問題，有必要提供一種能夠快速、精準(zhǔn)鑒定仙草品種的SSR分子標(biāo)記引物、仙草品種的鑒定方法及試劑盒。

一種SSR分子標(biāo)記引物，用于擴(kuò)增仙草中含有SSR分子標(biāo)記的核苷酸片段所述SSR分子標(biāo)記包括SSR80位點、SSR82位點、SSR83位點、SSR100位點、SSR102位點及SSR106位點中的至少一種，所述SSR80位點的核苷酸序列包含以ACACG為重復(fù)單元的串聯(lián)重復(fù)序列，所述SSR82位點的核苷酸序列包含以AGATA為重復(fù)單元的串聯(lián)重復(fù)序列，所述SSR83位點的核苷酸序列包含以ATAAA為重復(fù)單元的串聯(lián)重復(fù)序列，所述SSR100位點的核苷酸序列包含以AATCT為重復(fù)單元的串聯(lián)重復(fù)序列，所述SSR102位點的核苷酸序列包含以TTTAT為重復(fù)單元的串聯(lián)重復(fù)序列，所述SSR106位點的核苷酸序列包含以TCCACA為重復(fù)單元的串聯(lián)重復(fù)序列。

上述SSR分子標(biāo)記引物能夠快速、準(zhǔn)確地確定仙草的品種。

在其中一個實施例中，所述SSR80位點的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所示，所述SSR82位點的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.2所示，所述SSR83位點的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.3所示，所述SSR100位點的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.4所示，所述SSR102位點的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.5所示，所述SSR106位點的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.6所示。

在其中一個實施例中，包括用于擴(kuò)增含有SSR80位點的核苷酸片段、含有SSR82位點的核苷酸片段、含有SSR100位點的核苷酸片段及含有SSR106位點的核苷酸片段的引物中的至少一種。

在其中一個實施例中，用于擴(kuò)增含有所述SSR80位點的核苷酸片段的引物的序列分別如SEQ?ID?NO.7～SEQ?ID?NO.8所示；用于擴(kuò)增含有所述SSR82位點的核苷酸片段的引物的序列分別如SEQ?ID?NO.9～SEQ?ID?NO.10所示；用于擴(kuò)增含有所述SSR83位點的核苷酸片段的引物的序列分別如SEQ?ID?NO.11～SEQ?ID?NO.12所示；用于擴(kuò)增含有所述SSR100位點的核苷酸片段的引物的序列分別如SEQ?ID?NO.13～SEQ?ID?NO.14所示；用于擴(kuò)增含有所述SSR102位點的核苷酸片段的引物的序列分別如SEQ?ID?NO.15～SEQ?ID?NO.16所示；用于擴(kuò)增含有所述SSR106位點的核苷酸片段的引物的序列分別如SEQ?ID?NO.17～SEQ?IDNO.18所示。

一種仙草品種的鑒定方法，包括以下步驟：