[發明專利]一種同時測定雷公藤中4種有效成分含量的方法在審
| 申請號: | 201910098331.6 | 申請日: | 2019-01-31 |
| 公開(公告)號: | CN111505176A | 公開(公告)日: | 2020-08-07 |
| 發明(設計)人: | 穆淑珍;張玉梅;張仕林;尚秘;吳勁勇;葛秋平;毛松 | 申請(專利權)人: | 貴州漢方藥業有限公司 |
| 主分類號: | G01N30/06 | 分類號: | G01N30/06;G01N30/74 |
| 代理公司: | 北京聯創佳為專利事務所(普通合伙) 11362 | 代理人: | 趙恒英 |
| 地址: | 550029 貴州省貴陽市高新*** | 國省代碼: | 貴州;52 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 同時 測定 雷公藤 有效成分 含量 方法 | ||
1.一種同時測定雷公藤中4種有效成分含量的方法,其特征在于:是同時對雷公藤中雷公藤甲素、雷公藤內酯酮、雷公藤紅素和雷公藤酯甲的含量測定,具體含量測定方法包括:
混合對照品溶液的制備:
①精密稱取對照品雷公藤甲素、雷公藤內酯酮、雷公藤紅素、雷公藤酯甲,分別加入甲醇溶解,搖勻,得各對照品儲備液;
②精密量取各對照品儲備液1mL于10mL容量瓶中,加甲醇并定容至刻度,混合,搖勻,精密量取1mL混合液,稀釋成10mL,制備成混合對照品溶液;
供試品溶液的制備:
①稱取干燥粉碎后的雷公藤藥材,加乙醇回流提取兩次,過濾,合并濾液,濃縮至無乙醇味,干燥至恒重;
②精密稱取干燥后的殘渣于錐形瓶中,加入乙酸乙酯,超聲處理,過濾,用乙酸乙酯分次洗滌錐形瓶和漏斗,合并濾液及洗液,旋轉蒸發儀回收溶劑,殘渣用乙酸乙酯溶解,經過中性氧化鋁柱,用乙酸乙酯洗脫,收集洗脫液,回收溶劑;
③步驟②中殘渣用甲醇溶解并轉移至5mL量瓶中,定容至刻度,搖勻,經0.45μm濾膜濾過,取續濾液,即得各供試品溶液;
色譜條件:色譜柱:Thermo Hypersil GOLD Phenyl Dim,250mm×4.6mm,5μm;流動相A:0.1%磷酸溶液-0.2%三乙胺溶液;流動相B:乙腈,梯度洗脫;檢測波長:0~65min為225nm,65min時切換為210nm;流速:0.75mL/min;柱溫:25℃;進樣量:10μL;
測定方法:分別精密吸取混合對照品溶液與供試品溶液,在上述色譜條件下,分別測量雷公藤甲素、雷公藤內酯酮、雷公藤紅素、雷公藤酯甲的面積,計算,即得。
2.如權利要求1所述的同時測定雷公藤中4種有效成分含量的方法,其特征在于:所述混合對照品溶液的制備是:
①精密稱取對照品雷公藤甲素、雷公藤內酯酮、雷公藤紅素、雷公藤酯甲各10μl,分別置于10mL容量瓶中,加入甲醇溶解并定容至刻度,搖勻,得各對照品儲備液;
②精密量取各對照品儲備液1mL于10mL容量瓶中,加甲醇并定容至刻度,混合,搖勻,精密量取1mL混合液,稀釋成10mL,制備成混合對照品溶液。
3.如權利要求1中所述的同時測定雷公藤中4種有效成分含量的方法,其特征在于:所述供試品溶液的制備是:
①雷公藤藥材干燥粉碎后過40目篩,精密稱取15g,加入95%乙醇,其料液比為1:3,75℃回流提取兩次,每次4.5h,過濾,合并濾液,濃縮至無乙醇味,干燥至恒重;
②精密稱取干燥后的殘渣0.5g于錐形瓶中,加入乙酸乙酯30mL,超聲處理30min,超聲提取功率為300w,過濾,用30mL乙酸乙酯分次洗滌錐形瓶和漏斗,合并濾液及洗液,旋轉蒸發儀回收溶劑,殘渣用10mL乙酸乙酯溶解,經過中性氧化鋁柱,100~200目,3.5g,內徑1cm,乙酸乙酯濕法裝柱,用35mL乙酸乙酯洗脫,收集洗脫液,回收溶劑;
③步驟②中殘渣用甲醇溶解并轉移至5mL量瓶中,定容至刻度,搖勻,經0.45μm濾膜濾過,取續濾液,即得各供試品溶液。
4.如權利要求1中所述的同時測定雷公藤中4種有效成分含量的方法,其特征在于:梯度洗脫時,梯度洗脫程序為:0~10min,20%~35%B;10~15min,35%~40%B;15~35min,40%B;35~50min,40%~45%B;50~60min,40%~45%B;60~75min,65%~75%B。
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