[發明專利]燕麥隱性核不育基因分子標記及應用在審
| 申請號： | 201910026024.7 | 申請日： | 2019-01-11 |
| 公開（公告）號： | CN109644863A | 公開（公告）日： | 2019-04-19 |
| 發明（設計）人： | 張麗君;劉龍龍;馬名川 | 申請（專利權）人： | 山西省農業科學院農作物品種資源研究所 |
| 主分類號： | A01H1/02 | 分類號： | A01H1/02;A01H1/04 |
| 代理公司： | 西安匯智創想知識產權代理有限公司 61247 | 代理人： | 李恒 |
| 地址： | 030000 *** | 國省代碼： | 山西;14 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 燕麥 隱性核不育系 分子標記 不育基因 引物 隱性核不育基因 人工去雄雜交 不育系育性 高產性能 核不育系 基因定位 控制基因 目標單株 品種改良 遺傳背景 應用意義 育種過程 植株 不育系 克隆性 突變體 染色體 親本 性狀 分化 篩選 應用 生產 | ||
1.一種燕麥隱性核不育系RI2014的生產方法，其特征在于：包括以下步驟：
將原始發現的隱形核不育皮燕麥“CAMS”和裸燕麥“80066”雜交，雜交種通過自交一代獲得F2代，選擇不育的裸燕麥與裸燕麥“80066”回交、自交一代得到BC1F2，選擇不育的裸燕麥與裸燕麥“80066”繼續回交、自交一代得到BC2F2，選擇不育的裸燕麥與裸燕麥“80066”繼續回交、自交一代得到BC3F2，通過單粒傳法構建重組自交系，在F12代篩選得到的裸燕麥不育系RI 2014。
2.權利要求1所述的一種燕麥隱性核不育系RI2014的用途，其特征在于，燕麥隱性核不育系RI2014與不同皮燕麥、裸燕麥雜交得到的F1均可育。
3.一種燕麥隱性核不育系RI2014不育基因的分子標記方法，其特征在于：以編號為CL1155，CL907，CL210，Uni2358，Uni2612，CL248，Uni20087對引物，進行PCR擴增，將所得產物利用聚丙烯胺凝膠檢測，能夠進行擴增的即為含有不育基因的單株，結合單株表型，將控制RI2014S不育系育性性狀的基因定位于染色體23.0Mb區段內，所述的編號為CL1155的正向引物序列如序列表中SEQ ID NO:1所示，所述的編號為CL1155的反向引物序列如序列表中SEQ ID NO:2所示，所述的編號為CL907的正向引物序列如序列表中SEQ ID NO:3所示，所述的編號為CL907的反向引物序列如序列表中SEQ ID NO:4所示，所述的編號為CL210的正向引物序列如序列表中SEQ ID NO:5所示，所述的編號為CL210的反向引物序列如序列表中SEQ ID NO:6所示，所述的編號為Uni2358的正向引物序列如序列表中SEQ ID NO:7所示，所述的編號為Uni2358的反向引物序列如序列表中SEQ ID NO:8所示，所述的編號為Uni2612的正向引物序列如序列表中SEQ ID NO:9所示，所述的編號為Uni2612的反向引物序列如序列表中SEQ ID NO:10所示，所述的編號為CL248的正向引物序列如序列表中SEQ ID NO:11所示，所述的編號為CL248的反向引物序列如序列表中SEQ ID NO:12所示，所述的編號為Uni20087的正向引物序列如序列表中SEQ ID NO:13所示，所述的編號為Uni20087的反向引物序列如序列表中SEQ ID NO:14所示。
4.根據權利要求3所述的一種燕麥隱性核不育系RI2014不育基因的分子標記方法，其特征在于：具體包括以下步驟：
（1）以燕麥品種品燕2號作為父本，以所得到的不育單株RI2014S作為母本，雜交得到F1代，利用F1代自交一代得到育性分離的F2群體, 通過田間性狀調查表明：不育單株：可育單株分離比為1:3,
（2）提取F2群體單株總DNA，取10株可育單株的總DNA等量混合作為可育池模板，取10株不育單株的總DNA等量混合作為不育池模板，
（3）采用皮燕麥隱性核不育植株的近等基因系CAMS1進行轉錄組測序開發的2073對標記作為引物，進行PCR擴增，
（4）將所得的擴增產物用聚丙烯酰胺凝膠檢測，篩選得到多態性標記；以獲得的多態性標記引物7對，引物編號為CL1155，CL907，CL210，Uni2358，Uni2612，CL248，Uni2008，
（5）以F2群體全部單株為模板進行PCR擴增，將所得產物利用聚丙烯胺凝膠檢測，能夠進行擴增的即為含有不育基因的單株，結合單株表型，將控制RI2014不育系育性性狀的基因定位于染色體23.0Mb區段內。
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