[發(fā)明專利]基因和化學(xué)藥物共轉(zhuǎn)運(yùn)載體及其使用方法有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201811307307.0 | 申請(qǐng)日： | 2018-11-05 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN109364264B | 公開(kāi)（公告）日： | 2021-12-10 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 曹美文;趙文婧;盧沙;王瑜;王生杰;夏永清 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 中國(guó)石油大學(xué)（華東） |
| 主分類號(hào)： | A61K47/64 | 分類號(hào)： | A61K47/64;A61K9/08;A61K31/704;A61K31/713;A61K31/538;A61K45/06 |
| 代理公司： | 青島清泰聯(lián)信知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 37256 | 代理人： | 李祺;張潔 |
| 地址： | 266580 山東省*** | 國(guó)省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 基因 化學(xué) 藥物 轉(zhuǎn)運(yùn) 載體 及其 使用方法 | ||
1.多肽/藥物/基因分子負(fù)載體，其特征在于，將多肽分子溶于緩沖液中自組裝為納米纖維狀結(jié)構(gòu)，先與疏水性藥物分子或模擬藥物分子溶液充分結(jié)合，得到多肽/藥物分子負(fù)載體溶液，再將所述多肽/藥物分子負(fù)載體溶液與基因分子溶液在預(yù)定條件下充分混合制備得到，即多肽/藥物/基因分子負(fù)載體溶液；
其中，所述預(yù)定條件為：溶液中基因分子濃度為1-50μg/mL，多肽分子正電荷與基因分子負(fù)電荷數(shù)目的比例為5.0-50.0；
所述將多肽分子溶于緩沖液中自組裝為納米纖維狀結(jié)構(gòu)的步驟包括：
配制濃度為2.0-10.0 mM的多肽分子溶液，溶于pH為7.2-7.4的緩沖溶液中，放置3天以上，自組裝為納米纖維狀結(jié)構(gòu)；
其中，所述多肽分子的序列為：
Ac-IIIIIGPLGLAGGRRRRRRRR-NH2，結(jié)構(gòu)式為：
。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的多肽/藥物/基因分子負(fù)載體，其特征在于，所述多肽分子在濃度大于4.0 mM時(shí)，自組裝為納米纖維狀結(jié)構(gòu)，納米纖維直徑為5-8 nm，長(zhǎng)度為500 nm-10μm。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的多肽/藥物/基因分子負(fù)載體，其特征在于，所述多肽/藥物分子負(fù)載體溶液的配制步驟包括：
將疏水性藥物分子或模擬藥物分子溶于熟化的多肽分子溶液，超聲20-30分鐘，放置6-24小時(shí)，使藥物分子充分與多肽分子自組裝后的納米纖維作用結(jié)合，然后離心，除去溶液底部未結(jié)合的藥物分子沉淀，上層溶液即為多肽/藥物分子負(fù)載體溶液。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的多肽/藥物/基因分子負(fù)載體，其特征在于，所述疏水性藥物分子為阿霉素，所述模擬藥物分子為尼羅紅。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的多肽/藥物/基因分子負(fù)載體，其特征在于，所述多肽/藥物/基因分子負(fù)載體溶液的配制步驟包括：
配制濃度為50 μg/mL的λ-DNA溶液，溶于pH為7.2-7.4的緩沖溶液中，得到基因分子溶液；
將所述多肽/藥物分子負(fù)載體溶液與基因分子溶液按照預(yù)定條件充分混合，得到多肽/藥物/基因分子負(fù)載體溶液。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的多肽/藥物/基因分子負(fù)載體，其特征在于，實(shí)現(xiàn)藥物向細(xì)胞內(nèi)的有效輸運(yùn)和基因的有效轉(zhuǎn)染步驟包括：將多肽/藥物/基因分子負(fù)載體溶液與細(xì)胞共培養(yǎng)，培養(yǎng)4-12小時(shí)后將培養(yǎng)液換為含10%血清的DMEM培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)24-48小時(shí)。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的多肽/藥物/基因分子負(fù)載體，其特征在于，所述細(xì)胞為HEK293細(xì)胞。
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