本發明涉及黃氏響聲丸HPLC—ELSD指紋圖譜的測定方法，其中所述測定方法，包括以下步驟：供試品溶液的制備、對照品溶液的制備、注入液相色譜儀(蒸發光散射檢測器)進行測定，在標準指紋圖譜的基礎上，用上述測定方法得到的黃氏響聲丸質量是否合格的數據，本發明方法簡便、快捷、準確、穩定、可靠，可用于黃氏響聲丸樣品的質量控制，能更加全面、客觀、科學地評價黃氏響聲丸的質量，保證該制劑的有效性。

技術領域

本發明涉及中藥指紋圖譜分析方法，具體涉及黃氏響聲丸制劑指紋圖譜測定方法，及其所得到的黃氏響聲丸制劑指紋圖譜。

技術背景

我國傳統中藥及復方制劑的組成十分復雜，因為其治療作用是通過整體的協調進行的。因此在對其進行質量評價時應該將其作為一個整體進行。然而一般的質量標準是通過對中藥或復方中的某個成分的含量高低來評價。這樣難以控制其內在質量。因此為了提高并突出中藥的整體性特征，建立符合中藥特征的質量控制標準及評價模式。才能逐步符合中藥及中藥發展的要求，真正的做到“安全、有效、穩定、可控”。

黃氏響聲丸是根據著名喉科老中醫黃莘農主任醫師奉獻的九代祖傳秘方研制而成，其主要用于急、慢性喉炎等證。其質量標準收載于《中國藥典》2010版一部第1469頁，其中鑒別試驗包括大黃、川芎、甘草，含量測定檢測浙貝母中的貝母素甲和貝母素乙。

該制劑處方包括薄荷、浙貝母、連翹、蟬蛻、胖大海、酒大黃、川芎、兒茶、桔梗、訶子肉、甘草和薄荷腦十二種原材料中的有效成分。

現有的檢測方法有：《黃氏響聲丸制劑指紋圖譜的測定方法及其標準指紋圖譜》(專利)，該方法是利用氣相色譜儀建立氣相色譜的指紋圖譜檢測方法，對黃氏響聲丸中的揮發性成分進行測定分析。

《高效液相色譜法同時測定黃氏響聲丸中5種蒽醌類成分含量》等文獻中，新建的含量方法，利用高效液相色譜-UV檢測器的手段，主要測定來源酒大黃的7種成分，包括蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚、番瀉苷A和番瀉苷B。但藥典上對于黃氏響聲丸質量評價的檢測方法是利用高效液相-ELSD檢測器，測定貝母素甲，貝母素乙的含量，并無從整體去對該制劑進行評價，因此建立黃氏響聲丸HPLC—ELSD指紋圖譜方法，從整體上去評價此藥。

發明內容

本發明的目的在于：提供一種黃氏響聲丸HPLC—ELSD指紋圖譜的測定方法

本發明通過對黃氏響聲丸HPLC—ELSD指紋圖的研究，提供了一種快速評價該制劑中成分質量的方法，彌補了現有質量控制技術的不足的缺點，使黃氏響聲丸制劑質量控制技術更為完善，也更為科學。

為此，本發明提供一種黃氏響聲丸氣相色譜標準指紋圖譜的建立以及使用該指紋圖譜對生產和銷售中的黃氏響聲丸進行測定的方法。

本發明所述的測定方法，其特征在于，步驟如下：

(1)供試品溶液的制備：取黃氏響聲丸，粉碎，取約4g，精密稱定，置錐形瓶中，加入85％甲醇50ml，超聲1小時，放冷，過濾，蒸干，用25ml水溶解，轉移至分液漏斗中，用乙酸乙酯萃取3次，每次25ml，合并乙酸乙酯萃取液，揮干，殘渣用甲醇溶解，轉移至5ml容量瓶，加甲醇稀釋至刻度，搖勻即得。

(2)測定方法：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl注入HPLC—ELSD色譜儀，測定，并記錄色圖譜。

(3)將所得色譜圖和標準指紋圖譜對照，相似度大于0.75為合格品，相似度評價采用《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統2004A版》進行評價。

其中，所述的色譜條件如下：

碳十八烷基為固定性的液相色譜柱；

流動相：甲醇(A)-0.5％醋酸溶液(B)

流速 0.8ml/min