本發明涉及一種葉酸修飾的殼聚糖納米顆粒及其制備和應用，將葉酸FA、EDC、NHS加入溶劑中，攪拌，得到混合溶液；混合溶液加入到制備的殼聚糖溫敏嵌段共聚物CS?g?PNIPAM的水溶液中，攪拌，透析，冷凍干燥，即得。本發明采用RAFT法，反應穩定，不會發生爆聚，且反應所得產物分子量分散寬度低。

技術領域

本發明屬于復合納米材料及其制備和應用領域，特別涉及一種葉酸修飾的殼聚糖納米顆粒及其制備和應用。

背景技術

殼聚糖作為一種天然的陽離子多糖，來源廣泛并且價格比較便宜、沒有毒害,具有良好的生物相容性和生物可降解性等優點，可廣泛應用于醫藥、食品還有化工等領域。但是殼聚糖也存在很多的不足，殼聚糖分子間存在氫鍵使得殼聚糖結晶度高，因此它不溶于一般的有機溶劑，從而大大限制了殼聚糖的應用。所以殼聚糖的改性研究應運而生，并取得了許多進展。目前，伴隨著可控/活性自由基聚合在合成結構明確、分子量可控高分子方面的發展，殼聚糖的可控接枝改性也取得了十分不錯的成績。在殼聚糖分子中鍵合、親水性的或具有某種特殊功能的合成高分子，可以改善殼聚糖的某些性能，提高殼聚糖的應用范圍。另外，CS也被認為是具有pH敏感性質的天然聚合物。殼聚糖的接枝聚合物不僅具有殼聚糖的特點，而且具有合成聚合物的優點。由于其在藥物遞送系統開發中的潛力已經廣泛應用于制藥工業。

乳腺癌是威脅女性健康最常見的危險之一,為了提高乳腺癌臨床治療的療效，納米制劑一直是研究的焦點，以提高PTX在抗腫瘤藥物治療領域的溶解度和靶向效率。然而對于癌癥治療，納米顆粒對腫瘤的特異性需要進一步改進，現有技術已經使用與腫瘤細胞表面上的特定生物標志物結合的生物靶向部分的例子，這些主動靶向策略能夠識別并且特異性結合修飾納米顆粒的表面的靶分子，增強納米顆粒被運輸到腫瘤細胞的能力。

葉酸受體(FR)在一些實體腫瘤細胞表面呈現高表達狀態，如卵巢癌，腎母細胞瘤，宮頸癌，肺癌等。然而，在正常組織細胞中表達量很低甚至不表達，葉酸修飾的生物材料具有主動靶向于腫瘤組織與細胞的潛能。葉酸修飾的納米顆粒可以通過其受體介導的細胞內吞作用的方式進入細胞。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種葉酸修飾的殼聚糖納米顆粒及其制備和應用，克服了現有復合納米材料的細胞選擇代謝性能差等的缺陷，該方法操作簡單、反應條件溫和，且所得產物FA-CS-g-PNIPAM的分子量分散寬度低，殼聚糖聚合物納米顆粒粒徑在200nm左右能最大程度到達乳腺癌被特定組織或細胞選擇性代謝。

本發明的一種葉酸修飾的殼聚糖納米顆粒的制備方法，步驟包括：

(1)將葉酸FA、EDC、NHS加入溶劑中，攪拌，得到混合溶液；

(2)混合溶液加入到殼聚糖溫敏嵌段共聚物CS-g-PNIPAM的水溶液中，攪拌，透析，冷凍干燥，即得葉酸修飾的殼聚糖納米顆粒。

上述制備方法的優選方式如下：

所述步驟(1)中葉酸、EDC、NHS的摩爾比為1:1:1。

所述步驟(1)中攪拌為：室溫條件下攪拌22～26h。

所述步驟(2)中混合溶液、CS-g-PNIPAM的水溶液的體積比為1:1。

所述步驟(2)中CS-g-PNIPAM由以下方法制備：將乙酰化殼聚糖溶于溶劑中，加入鏈轉移劑、催化劑、脫水劑，室溫攪拌，提純，凍干，得到殼聚糖的RAFT試劑；將殼聚糖的RAFT試劑溶于溶劑中，氮氣保護下，加入N-異丙基丙烯酰胺NIPAM和引發劑，油浴反應，提純，即得。

所述乙酰化殼聚糖具體為：殼聚糖CS溶解于1％醋酸溶液中，加入甲醇攪拌至澄清，再滴加入乙酸酐溶液，室溫攪拌反應，10％NaOH析出沉淀，經過濾、烘干得到乙酰化殼聚糖。