本發明要求保護一種西羅莫司的檢測方法，其包括如下步驟：配制西羅莫司最穩定的磷酸鹽緩沖液；配制含有抗氧化劑的乙腈溶液；再將待測樣品溶于含有抗氧化劑乙腈溶液中，得到西羅莫司的乙腈溶液，將待測樣品溶于含有抗氧化劑乙腈中，磷酸緩沖液定容；西羅莫司標準品含有抗氧化劑乙腈溶液中，磷酸緩沖液定容并稀釋，分別進樣標準品與待測樣品溶液至高效液相色譜，以標準品溶液測試結果作圖，計算回歸方程，用樣品測試結果帶入方程計算濃度。本發明的西羅莫司的檢測方法采用更加穩定的溶劑對西羅莫司進行溶解，使待測西羅莫司溶液以及西羅莫司標準品更加穩定，減少西羅莫司隨時間降解對測試的影響。

技術領域

本發明涉及醫療技術領域，具體涉及一種西羅莫司的檢測方法。

背景技術

西羅莫司(Sirolimus)，屬大環內酯類抗生素，具有免疫抑制作用，其透過細胞膜可以與FKBP-12(FK506結合蛋白)結合生成Sirolimus－FKBP-12復合物，抑制mTOR激酶的活性，從而起到抑制細胞增殖的作用。微量西羅莫司的檢測通常采用高效液相色譜，用乙腈為溶液，乙腈和水的混合物為流動相進行檢測，西羅莫司對酸堿敏感，溶液的不穩定容易造成西羅莫司降解。

發明內容

本發明針對目前西羅莫司易降解的問題，采用更加穩定的溶劑及抗氧化劑對西羅莫司進行溶解，減少西羅莫司隨時間降解對測試的影響。

本發明的目的是通過如下技術方案實現的：一種西羅莫司的檢測方法，其包括如下步驟：

(1)配制西羅莫司最穩定的磷酸鹽緩沖液，用于配制西羅莫司溶液，防止pH值的變化造成西羅莫司降解；

(2)在乙腈中加入適量抗氧化劑，制成含有抗氧化劑的乙腈溶液，防止西羅莫司在溶液中的氧化降解；

(3)A.將待測樣品溶于步驟(2)的含有抗氧化劑乙腈溶液中，得到西羅莫司的乙腈溶液，

B.取已知重量西羅莫司標準品溶于步驟(2)的含有抗氧化劑乙腈溶液中得到西羅莫司標準品的乙腈溶液；

(4)A.西羅莫司的乙腈溶液加入步驟(1)的磷酸鹽緩沖液并定容，得到待測液，

B.西羅莫司標準品的乙腈溶液加入步驟(1)的磷酸鹽緩沖液并定容，分別稀釋至復數個不同濃度，作為標準液，用于標準曲線制備；

(5)分別進樣待測液和標準液到高效液相色譜中進行檢測，以復數個不同濃度的標準液測量結果做圖，得到回歸方程，計算得出待測液中西羅莫司濃度。

本發明優選的技術方案中，步驟(5)中，以3-10個不同濃度的標準液測量結果做圖，得到回歸方程。

本發明的西羅莫司的檢測方法針對目前西羅莫司易降解的問題，采用更加穩定的溶劑對西羅莫司進行溶解，使待測西羅莫司溶液以及西羅莫司標準品更加穩定，減少西羅莫司隨時間降解對測試的影響。

附圖說明

圖1是配制本發明的西羅莫司的檢測方法一實施例流程圖。

具體實施方式

為進一步理解本發明，下面結合具體實施例對本發明優選方案進行描述，但是應當理解，這些描述只是為進一步說明本發明的特征和優點，而不是對本發明權利要求的限制。

以下結合具體實施例對上述方案做進一步說明。實施例中采用的實施條件可以根據具體廠家的條件做進一步調整，未注明的實施條件通常為常規實驗中的條件。

實施例1

一種西羅莫司的檢測方法，其包括如下步驟：

(1)根據前期實驗數據以及文獻資料，配制西羅莫司最穩定pH值的磷酸鹽緩沖液，用于配制西羅莫司溶液，防止pH值的變化造成西羅莫司降解；