[發明專利]抗輪狀病毒感染的真核細胞膜包覆仿生納米粒及其制備方法有效
| 申請號： | 201810122851.1 | 申請日： | 2018-02-07 |
| 公開（公告）號： | CN108338977B | 公開（公告）日： | 2020-06-09 |
| 發明（設計）人： | 李桂玲;魏瀟萌;丁維明;于菲菲;牛霞;周文凱 | 申請（專利權）人： | 中國醫學科學院醫藥生物技術研究所 |
| 主分類號： | A61K9/50 | 分類號： | A61K9/50;A61K47/04;A61P31/14 |
| 代理公司： | 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245 | 代理人： | 關暢;任鳳華 |
| 地址： | 100050 北京市東城區天*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 輪狀病毒 感染 真核細胞 膜包覆 仿生 納米 及其 制備 方法 | ||
1.抗輪狀病毒感染的細胞膜仿生納米粒，所述細胞膜仿生納米粒由外殼和所述外殼包覆的內核組成，所述外殼為真核細胞膜，所述內核為介孔二氧化硅納米粒，所述真核細胞膜為Caco-2細胞膜或MDCK細胞膜；所述細胞膜仿生納米粒的粒徑為80-120nm、90-96nm或93-95nm；所述細胞膜仿生納米粒的粒徑多分散系數為≤0.3、≤0.25或≤0.2。
2.根據權利要求1所述的細胞膜仿生納米粒，其特征在于：所述細胞膜仿生納米粒的Zeta電位為0至-20mV。
3.根據權利要求2所述的細胞膜仿生納米粒，其特征在于：所述細胞膜仿生納米粒的Zeta電位為0至-12mV。
4.根據權利要求3所述的細胞膜仿生納米粒，其特征在于：所述細胞膜仿生納米粒的Zeta電位為-10至-11mV。
5.根據權利要求1-4中任一所述的細胞膜仿生納米粒，其特征在于：所述細胞膜仿生納米粒按照包括如下步驟的方法制備：用真核細胞制備真核細胞膜小體，用所述真核細胞膜小體包覆介孔二氧化硅納米粒，得到細胞膜仿生納米粒；所述真核細胞為Caco-2細胞或MDCK細胞。
6.根據權利要求5所述的細胞膜仿生納米粒，其特征在于：所述制備真核細胞膜小體包括：1)用細胞裂解液在4℃裂解所述真核細胞2.5小時，然后進行勻漿破碎細胞，再離心收集沉淀，得到所述真核細胞膜；2)將所述真核細胞膜進行功率為50W和頻率為20-25KHz的超聲波處理1分鐘，用脂質體擠出器采用孔徑為100-400nm、200-400nm或200nm的濾膜，在0.3Mpa的擠出壓力下擠出，得到所述真核細胞膜小體。
7.根據權利要求6所述的細胞膜仿生納米粒，其特征在于：所述離心收集沉淀包括：先以500g離心5min收集上清液，將該上清液命名為上清液1；對所述上清液1采用10000g離心5min收集上清液，將該上清液命名為上清液2；對所述上清液2進行100000g離心1h，收集沉淀，所述沉淀為所述真核細胞膜。
8.根據權利要求6所述的細胞膜仿生納米粒，其特征在于：用所述真核細胞膜小體包覆介孔二氧化硅納米粒包括將所述真核細胞膜小體與介孔二氧化硅納米粒進行功率為80W和頻率為20-25KHz的超聲波處理2分鐘，用脂質體擠出器采用孔徑為100-400nm、200-400nm或200nm的濾膜，在0.3Mpa的擠出壓力下擠出，得到細胞膜仿生納米粒。
9.制備權利要求1-4中任一所述的細胞膜仿生納米粒的方法，包括用真核細胞制備真核細胞膜小體，用所述真核細胞膜小體包覆介孔二氧化硅納米粒，得到細胞膜仿生納米粒；所述真核細胞為Caco-2細胞或MDCK細胞。
10.根據權利要求9所述的方法，其特征在于：所述制備真核細胞膜小體包括：1)用細胞裂解液在4℃裂解所述真核細胞2.5小時，然后進行勻漿破碎細胞，再離心收集沉淀，得到所述真核細胞膜；2)將所述真核細胞膜進行功率為50W和頻率為20-25KHz的超聲波處理1分鐘，用脂質體擠出器采用孔徑為100-400nm、200-400nm或200nm的濾膜，在0.3Mpa的擠出壓力下擠出，得到所述真核細胞膜小體。
11.根據權利要求10所述的方法，其特征在于：所述離心收集沉淀包括：先以500g離心5min收集上清液，將該上清液命名為上清液1；對所述上清液1采用10000g離心5min收集上清液，將該上清液命名為上清液2；對所述上清液2進行100000g離心1h，收集沉淀，所述沉淀為所述真核細胞膜。
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